鸡白细胞介素18纳米抗体的筛选与评价

摘要

为制备特异性识别鸡白细胞介素18(Chicken Interleukin-18, chIL-18)的纳米抗体，本研究构建了chIL-18蛋白表达重组质粒并制备出chIL-18蛋白，利用chIL-18蛋白免疫羊驼，扩增羊驼外周血淋巴细胞的抗体基因重链可变区，构建chIL-18 Nb噬菌体展示文库。以chIL-18蛋白为靶标抗原对文库进行富集淘选，克隆与chIL-18蛋白反应阳性的重组噬菌体Nb序列，并将其构建到载体上进行Nb表达。对chIL-18 Nb进行生物学活性检测后将生物学活性最优的chIL-18 Nb进行初步应用评价。结果表明：1）本研究成功构建了库容量为6×10～8 PFU/mL的chIL-18 Nb噬菌体展示文库；2）获得5株具有良好反应活性、特异性和结合活性的chIL-18 Nb，其中Nb1生物学活性最佳，满足Western blot和IFA等试验抗体应用要求。综上，该研究首次获得与chIL-18蛋白特异性反应的Nb，为后续chIL-18定量检测方法的建立及生物学功能的研究提供材料支持。

关键词

鸡白细胞介素18 / 纳米抗体 / 噬菌体展示技术 / 特性鉴定