华支睾吸虫感染诱导小鼠肝巨噬细胞极化的动态变化研究

摘要

为分析华支睾吸虫感染过程中小鼠肝巨噬细胞极化的动态变化，本研究首先利用HE染色法检测感染后不同阶段肝脏病理与炎性浸润变化，再通过流式细胞术检测感染不同阶段M1/M2型肝巨噬细胞所占比例，随后通过qRT-PCR检测感染不同阶段M1型相关标志物iNOS、CD86和IL-1β与M2型相关标志物Arg1、CD206和Ym1 mRNA水平，并通过ELISA方法检测巨噬细胞相关促炎因子TNF-α和IL-1β与抑炎因子TGF-β1和IL-10分泌水平。结果表明：1）华支睾吸虫感染后，小鼠肝脏HE染色显示细胞由正常形态逐渐转变为纤维化病变，且炎性浸润在感染1～2周时较为明显，在感染6～10周时下降。2）流式细胞术结果显示，M1型肝巨噬细胞比例在感染1～2周时显著高于M2型肝巨噬细胞（P<0.01）,M2型肝巨噬细胞比例在感染3～10周时显著高于M1型肝巨噬细胞（P<0.01）。3)qRT-PCR结果显示，M1型标志物iNOS、CD86和IL-1β mRNA水平在感染1～4周呈升高后降低趋势，在感染6～10周时显著升高（P<0.01）。M2型标志物Arg1、CD206和Ym1 mRNA水平在感染1～10周时逐渐升高。4)ELISA结果显示，促炎细胞因子TNF-α和IL-1β水平在感染1～4周时呈升高后降低趋势，在感染6～10周时显著升高（P<0.01）。抑炎细胞因子TGF-β1和IL-10水平在感染1～10周时逐渐升高。综上，M1型巨噬细胞在感染早期优先升高并占主导，M2型巨噬细胞在感染中后期升高并占主导，M1和M2型巨噬细胞在卵排放阶段极化比例发生转变。本研究通过分析肝巨噬细胞极化的动态变化，为更好地控制华支睾吸虫病提供见解。

关键词

华支睾吸虫 / 肝巨噬细胞 / 极化动态分析 / 极化标志物 / 极化相关细胞因子

基金资助

国家自然科学基金项目（32172886,32361133554）; 黑龙江省自然科学基金项目（LH2021C071）; 黑龙江八一农垦大学三横三纵支持计划（ZRCQC202204）