三七总皂苷下调CD36信号通路对高脂饲料喂养小鼠血小板高反应性的抑制作用

摘要

目的：探讨膳食补充三七总皂苷（total saponins of Panax notoginseng,PNS）对高脂血症模型小鼠血小板高反应性的影响及其可能的分子机制。方法：将8周龄健康雄性C57BL/6J小鼠随机分为4组，即低脂饲料（low-fat diet,LFD）喂饲组（LFD组）、LFD+PNS组（LFD中添加PNS 200 mg/kg饲料）、高脂饲料（high-fat diet,HFD）喂饲组（HFD组）、HFD+PNS组（HFD中添加PNS 200 mg/kg饲料），实验干预12周后处死小鼠，分离血浆和提取纯化血小板，使用试剂盒检测血脂水平，血小板聚集仪测定血小板最大聚集率，流式细胞术和酶联免疫吸附法检测血小板活化指标，实时定量PCR技术检测血小板CD36 mRNA表达水平，Western blot免疫印迹实验检测血小板CD36蛋白表达、Src和p47^phox的磷酸化水平。结果：与LFD组相比，HFD组小鼠血浆总胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白胆固醇显著升高，膳食补充PNS可显著降低小鼠的血脂水平。在激动剂凝血酶的刺激下，膳食补充PNS显著降低由HFD诱导的小鼠血小板聚集和活化，如抑制血小板表面CD62P的表达和血小板因子4（platelet factor 4,PF4）及趋化因子配体5（chemokine ligand 5,CCL5）的释放，提示PNS可降低HFD诱导的小鼠血小板高反应性。机制上，膳食补充PNS显著降低由HFD诱导的小鼠血小板CD36 mRNA和蛋白表达，并且显著抑制由HFD诱导血小板CD36下游信号通路的活化，包括下调Src和p47^phox的磷酸化水平。此外，膳食补充PNS可显著抑制由HFD组小鼠血浆诱导的血小板表面CD62P的表达，在CD36分子的中和性抗体FA6-152的作用下，PNS的抑制作用被消除。结论：膳食补充PNS对高脂饲料喂养小鼠的血小板高反应性具有抑制作用，其作用机制可能是下调CD36信号通路，本研究为PNS改善高脂血症及其相关慢性代谢性疾病中血栓形成提供参考价值。

关键词

三七总皂苷 / 血小板高反应性 / CD36信号通路 / 高脂血症

基金资助

国家自然科学基金（82260638）; 云南省基础研究专项面上项目（202401AT070081）