IGF2BP3通过m6A-EP300轴介导乳酸化修饰驱动三阴性乳腺癌代谢与表观遗传交互作用

摘要

目的：探讨乳酸对三阴性乳腺癌（triple-negative breast cancer,TNBC）细胞恶性行为的影响，并揭示胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白3(insulin-like growth factor 2 m RNA binding protein 3,IGF2BP3)通过m6A依赖性方式调控EP300，进而介导代谢重编程的表观遗传学机制。方法：通过外源性添加乳酸钠处理TNBC细胞，采用CCK-8、集落形成、划痕愈合和Transwell实验检测细胞增殖与迁移能力；利用shRNA慢病毒载体构建IGF2BP3稳定敲低细胞模型，结合Western blot分析组蛋白乳酸化修饰水平；进一步通过RIP-seq、MeRIP-seq筛选IGF2BP3的m6A靶基因，并利用qRT-PCR和Western blot验证关键分子表达。结果：乳酸钠处理显著增强了TNBC细胞的增殖和迁移能力，且泛乳酸化水平随乳酸浓度梯度升高而增加。IGF2BP3敲低可降低组蛋白乳酸化修饰水平。通过整合RIP-seq和MeRIP-seq数据，鉴定出699个其转录本同时被IGF2BP3特异性结合且携带m6A修饰的候选基因，这些基因显著富集于表观遗传调控和代谢相关通路。EP300转录本上IGF2BP3的结合区域与m6A修饰位点高度重合，且EP300的表达水平在IGF2BP3敲低后明显下调。结论：外源性乳酸通过泛乳酸化修饰促进TNBC的恶性进展。IGF2BP3通过m6A依赖性机制调控EP300的表达，进而介导组蛋白乳酸化修饰与代谢重编程的协同作用，最终驱动TNBC的肿瘤进展。上述发现为靶向代谢-表观遗传交互调控的新型治疗策略提供了理论依据。

关键词

三阴性乳腺癌 / 乳酸 / IGF2BP3 / EP300