肿瘤相关成纤维细胞分泌THBS2通过PI3K/AKT通路驱动巨噬细胞M2极化促进结直肠癌进展

摘要

目的：探究肿瘤相关成纤维细胞（cancer-associated fibroblast,CAF）通过分泌血小板反应蛋白-2(thrombospondin-2,THBS2)促进巨噬细胞M2极化的作用及机制。方法：基于癌症基因组图谱（The Cancer Genome Atlas,TCGA）数据库分析结肠腺癌中THBS2的表达特征和临床意义；通过TISCH2单细胞数据库及多重免疫组化染色定位THBS2细胞来源，结合TIMER2.0评估其与免疫浸润相关性；利用Western blot、ELISA及原代CAF模型验证THBS2分泌特征；通过qRT-PCR、Transwell及PI3K/AKT通路检测评估THBS2对巨噬细胞极化、迁移及信号通路的调控。结果：THBS2在结肠癌肿瘤组织中高表达，与晚期TNM分期及患者不良预后密切相关。单细胞测序及实验证明THBS2特异性来源于CAF，与M2型巨噬细胞浸润呈强正相关。功能实验显示，CAF条件培养基显著上调巨噬细胞M2标志物[白细胞介素（interleukin,IL）-10、巨噬细胞甘露糖受体（macrophage mannose receptor,MMR）、CD206、精氨酸酶1(arginase-1,ARG1)，并促进迁移；重组蛋白THBS2激活PI3K/AKT通路，促进巨噬细胞M2极化，而THBS2敲低后极化及迁移效应被逆转。结论：CAF来源的THBS2可能通过激活PI3K/AKT信号通路诱导巨噬细胞向M2极化及迁移，从而促进结直肠癌免疫微环境重塑，为靶向结直肠癌CAF-THBS2轴的免疫治疗提供了实验依据。

关键词

肿瘤相关成纤维细胞 / THBS2 / 巨噬细胞极化