SENP1在SPOP去SUMO化修饰中的作用研究

摘要

目的：研究小泛素相关修饰物（small ubiquitin-related modifier,SUMO）修饰对SPOP(speckle type BTB/POZ protein蛋白水平和细胞定位的影响，并尝试在肾透明细胞癌（clear cell renal cell carcinoma,ccRCC）中探讨SUMO特异性蛋白酶1(sentrin-specific proteases 1,SENP1)和SPOP之间的相关性。方法：利用野生型（wild type,WT）和Senp1敲除的小鼠胚胎成纤维细胞研究Senp1对Spop蛋白水平和细胞定位的影响，并通过比较外源WT-Spop和Spop的SUMO修饰位点突变体的蛋白表达量，进一步确认SUMO修饰对Spop蛋白水平的影响。后续通过邻位连接技术（proximity ligation assay,PLA）研究WT-Spop及其SUMO修饰位点突变体与SUMO1的结合能力。最后通过ccRCC患者的RNA表达数据和ccRCC细胞系探讨SENP1和SPOP在ccRCC中的相关性。结果：Senp1敲除下调小鼠胚胎成纤维细胞中Spop的蛋白量和稳定性，但不影响其细胞核定位。突变Spop的SUMO修饰位点后，其与Sumo1的结合能力下降，蛋白量也有所降低。SENP1和SPOP的表达在ccRCC中呈正相关。结论：Senp1通过去SUMO化修饰稳定Spop蛋白，SENP1和SPOP的表达在ccRCC中呈正相关。

关键词

SPOP / SENP1 / SUMO修饰 / 肾透明细胞癌

基金资助

国家自然科学基金(81702747,82172629)