大别班达病毒mRNA疫苗的构建及初步评价

周婷婷; 郁心怡; 纪雪雯; 王桂芹; 吴梓菡; 闻瑜婷; 朱进; 刘新建

南京医科大学学报（自然科学版） ›› 2024, Vol. 44 ›› Issue (8) : 1120 -1125.

周婷婷, 郁心怡, 纪雪雯, 王桂芹, 吴梓菡, 闻瑜婷, 朱进, 刘新建

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摘要

目的：基于mRNA疫苗策略构建大别班达病毒（Bandavirus davieense virus,DBV）疫苗，并免疫BALB/c小鼠，评价其免疫学特征。方法：优化并合成DBV糖蛋白Gn序列，克隆至pGEM-3Zf（+）载体，质粒通过BamHⅠ酶切线性化，进行体外转录，酶法加帽和添加A尾制备mRNA，瞬时转染真核293FT细胞，免疫印迹验证蛋白的体外表达。通过脂质纳米颗粒递送mRNA，以低（2μg/只）、中（5μg/只）、高剂量（20μg/只）每2周肌肉注射1次免疫BALB/c小鼠，ELISA测定小鼠血清抗体效价，病毒中和实验评价小鼠血清阻断病毒感染细胞的能力。结果：制备的DBV mRNA疫苗能够进行体外转录和表达，低、中、高3个免疫剂量均能诱导小鼠产生高水平的特异性抗体，其中高剂量免疫组可诱导稳定抗体表达至10周以上；病毒中和实验显示，免疫血清能够与病毒结合，阻止病毒感染细胞。结论：获得了能够诱导小鼠产生特异性中和抗体的DBV mRNA疫苗，为DBV感染的预防奠定了研究基础。