Akt1上调FBXO6表达对胶质瘤细胞增殖和侵袭的影响

摘要

目的：检测胶质瘤组织和细胞中F盒蛋白（F-box protein,FBXO）6的表达及其对胶质瘤细胞增殖和侵袭的影响，并探究FBXO6表达的上游调控机制。方法：使用CGGA数据库分析胶质瘤患者肿瘤组织中FBXO6的表达及其与患者预后的相关性。行RT-PCR和Western blot检查胶质瘤细胞系（U251、U373和U87）中FBXO6的表达水平，筛选出FBXO6蛋白表达量最高的U87细胞。CCK-8和Transwell实验检测过表达和沉默FBXO6对U87细胞增殖和侵袭的影响。使用U0126(ERK1/2抑制剂)、SP600125(JNK抑制剂)和Perifosine(Akt1抑制剂)处理U87细胞，Western blot检查ERK1/2、JNK、Akt1的表达和磷酸化水平，之后行RT-PCR和Western blot检测FBXO6的表达变化，CCK-8和Transwell实验检测U87细胞增殖和侵袭能力。使U87细胞过表达FBXO6并给予Perifosine处理，进行RT-PCR、Western blot、CCK-8和Transwell实验，检测FBXO6表达、细胞增殖和侵袭能力。结果：胶质瘤患者癌组织中FBXO6高表达，且表达量与恶性程度相关，并与患者不良预后密切相关。3种胶质瘤细胞系U251、U373和U87均表达FBXO6，以U87细胞表达最为显著。过表达FBXO6基因后U87细胞的增殖和侵袭明显增强，而沉默FBXO6基因后U87细胞的增殖和侵袭明显减弱。Akt1抑制剂可显著下调U87细胞的FBXO6表达，而ERK1/2和JNK抑制剂对FBXO6的表达无明显影响。Akt1抑制剂可显著减弱U87细胞的增殖和侵袭，而过表达FBXO6可拮抗上述效应。结论：胶质瘤细胞中Akt1活化上调FBXO6基因的表达，促进细胞的增殖和侵袭。

关键词

胶质瘤 / FBXO6 / Akt1 / 增殖 / 侵袭