同种异体小鼠肾移植慢性抗体介导排斥反应模型的构建与鉴定

摘要

目的：构建并鉴定同种异体小鼠肾移植慢性抗体介导排斥反应（chronic antibody-mediated rejection,c ABMR）模型。方法：采用雄性6～8周龄BALB/c^H2d与C57BL/6^H2b小鼠，随机分为：（1）同基因对照组；（2）细胞介导的排斥反应组；（3）急性抗体介导排斥反应组（acute antibody-mediated rejection,aABMR）；（4）cABMR组1；（5）cABMR组2；（6）cABMR组3。移植肾行病理染色及Banff评分诊断，绘制生存曲线，检测移植肾组织中补体片段C3d沉积、外周血IgG类供体特异性抗体（donor specific antibody,DSA）、血清肌酐（creatinine,Cr）、血清尿素氮（blood urea nitrogen,BUN）水平，检测移植肾组织中CD3⁺T细胞、CD19⁺B细胞、F4/80标记的巨噬细胞、Ly6G标记的髓系细胞数量。结果：cABMR组1模型符合抗体介导排斥反应（antibody-mediated rejection,ABMR）诊断标准，术后存活率为80%,CD3⁺T细胞不明显，故选用cABMR组1作为cABMR模型进行后续论证。与对照组相比，cABMR的C3d表达阳性区域显著增多，外周血IgG类DSA平均荧光强度明显增强，外周血血清Cr与BUN水平明显升高。与aABMR相比，cABMR移植肾管周毛细血管出血、扩张，肾小球内可见单个核细胞浸润，肾小管内出现更典型的小管损伤及刷状缘脱落，Banff评分更高，C3d表达阳性区域显著增多，外周血IgG类DSA平均荧光强度显著增强，外周血血清Cr与BUN水平明显升高。与aABMR相比，cABMR肾间质和管周毛细血管CD19⁺B细胞、CD3⁺T细胞浸润均不显著，肾间质F4/80标记的巨噬细胞、Ly6G标记的髓系细胞浸润均更显著，Foxp3与白介素（interleukin,IL）-10的表达在cABMR模型中显著减少，IL-1β、IL-6、肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor α,TNF-α）、趋化因子CCL2炎症细胞因子的浸润在c ABMR模型中显著增多。结论：成功构建并鉴定一种生存周期得到延长的c ABMR模型，可在此模型的基础上评估cABMR的发生机制及干预措施，具有较高的临床应用价值。

关键词

肾移植 / 慢性抗体介导排斥反应 / 动物模型 / Banff分类

基金资助

国家自然科学基金（82170769,82470790）