槲皮素通过调控内质网应激信号通路改善非酒精性脂肪肝大鼠肝脏损伤

摘要

目的：基于内质网应激（endoplasmic reticulum stress,ERS）信号通路探讨槲皮素（quercetin,Que）对高脂饲料诱导的非酒精性脂肪肝（non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD）大鼠模型的干预作用及其机制。方法：高脂饲料喂养SD大鼠8周建立NAFLD模型，之后随机分为模型组、Que低剂量组（25 mg/kg）和Que高剂量组（50 mg/kg），另设正常饮食大鼠作为正常对照组，给药期间监测大鼠体重、进食量。继续饲养8周后，检测各组大鼠血清中胆固醇（total cholesterol,TC）、甘油三酯（triglyceride,TG）、低密度脂蛋白胆固醇（low-density lipoprotein-cholesterol,LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（high-density lipoprotein-cholesterol,HDL-C）、丙氨酸氨基转移酶（glutamic-pyruvic transaminase,ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（glutamic oxalacetic transaminase,AST）以及肝脏组织中TC、TG的含量变化；苏木素-伊红（hematoxylin-eosin,HE）染色、油红O染色、马松（Masson）染色观察大鼠肝脏组织的病理学变化；血糖仪检测大鼠血糖值并通过糖耐量试验评估大鼠糖耐量受损情况；酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA）试剂盒检测各组大鼠空腹胰岛素水平；实时荧光定量PCR法（quantitative real-time PCR,RT-qPCR）检测各组大鼠肝脏组织ERS相关基因Bip、Atf6、Atf4、Xbp-1s和Chop的表达变化；Western blot法检测各组大鼠肝脏组织ERS相关蛋白BiP、CHOP、ATF4、ATF6、XBP-1s和XBP-1u的表达变化。结果：实验期间，各组大鼠体重、进食量差异无统计学意义；与正常对照组比较，模型组大鼠血清TG、TC、LDL-C、AST、ALT浓度升高，HDL-C浓度降低（P<0.05）；与模型组比较，Que低剂量组大鼠血清TG、TC、LDL-C、AST、ALT浓度降低（P<0.05),Que高剂量组大鼠血清TG、TC、AST、ALT浓度降低（P<0.05）。与正常对照组比较，模型组大鼠肝脏体积增大，重量增加，肝细胞形态明显肿胀且呈空泡化，脂质沉积明显增加，且纤维化区域明显增加，同时大鼠出现胰岛素抵抗和糖耐量受损情况；与模型组比较，以上病理改变在Que低、高剂量组大鼠中有较明显改善。RT-qPCR和Western blot结果显示，与正常对照组比较，模型组大鼠肝脏组织中Bip、Atf6、Atf4、Xbp-1s和Chop mRNA表达显著升高，BiP、CHOP、ATF4、ATF6和XBP-1s蛋白表达显著升高；与模型组比较，Que低、高剂量组大鼠肝脏组织Bip、Atf6、Atf4、Xbp-1s和Chop m RNA表达降低，BiP、CHOP、ATF4、ATF6和XBP-1s蛋白表达也显著降低。结论：Que可以改善高脂饲料诱导的NAFLD大鼠脂代谢异常、糖耐量受损、肝脏脂质沉积以及病理损伤，其机制可能是通过调控ERS信号通路发挥作用。

关键词

非酒精性脂肪肝 / 内质网应激 / 槲皮素