利福平和利福布汀对rpoB基因突变而表型敏感的结核菌耐药性研究

摘要

目的：研究利福平（rifampicin,RIF）和利福布汀（rifabutin,RFB）两种药物对rpoB基因突变而表型敏感的结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis,MTB）耐药性的差异。方法：收集2022年1月—2024年12月南京中医药大学附属南京医院肺结核患者痰液或肺泡灌洗液标本，经MTB培养、Xpert分子药敏检测及rpoB基因测序，筛选出RIF表型敏感、低度耐药及部分高度耐药的rpoB突变菌株，采用浓度梯度法测定RIF和RFB的最小抑菌浓度（minimum inhibitory concentration,MIC）。结果：共纳入298株分子和表型药敏均呈阳性菌株，分子药敏检测RIF耐药的灵敏度为93.3%，特异度为94.6%，准确率为94.3%。在82株分子耐药菌株中，96.3%检测出rpoB基因突变，常见的突变点为531、526、511。琼脂固体药敏结果显示：S531L、H526Y、H526R、H526Q、D516V对RIF高度耐药；S512G、S522L、L533P对RIF低度耐药；H526L、D516Y、L511P、P483L对RIF敏感。MIC检测发现，仅H526L和L511P对两种药物均敏感；而S531L、L511P+H526Q双突变、H526D、D516Y、S512G、S522L、L533P、P483L等突变对RIF耐药但对RFB敏感。整体上，rpoB突变株对数转换的RIF MIC（log₂RIF-MIC）值[3.50（1.00,4.00）]显著高于对数转换的RFB MIC（log₂RFB-MIC）值[2.00（-3.00,3.75）]（Z=-4.481,P<0.001）。结论：rpoB突变位点差异导致MTB对RIF和RFB耐药水平不同。相比RIF,RFB对多种rpoB突变株（如L511P、H526L、D516Y、S522L等）具有更低的MIC值及潜在的临床有效性。通过对rpoB突变位点进行精准分析并评估其对RFB的敏感性，可为“分子耐药-表型敏感”的临床困境提供新思路，并为利福霉素类药物的个体化分层治疗提供依据。

关键词

分枝杆菌 / 表型药敏 / 基因突变 / 分层治疗 / 利福平 / 利福布汀