CPO-PCL微粒在缺氧条件下对脂肪间充质干细胞体外增殖及成骨分化作用的影响

摘要

目的：探究聚己内酯（polycaprolactone,PCL）包载过氧化钙（calcium peroxide,CPO）的CPO-PCL微粒在缺氧条件下对脂肪间充质干细胞（adipose-derived mesenchymal stem cell,ADMSC）体外增殖及成骨分化作用的影响。方法：提取大鼠ADMSC，并加入制备的CPO-PCL微粒，在缺氧/常氧环境下，正常培养或成骨分化培养细胞，分别于培养第7天和第14天MTT实验检测ADMSC增殖，碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）试剂盒检测ALP水平；茜素红染色观察钙化结节情况，免疫荧光染色观察ADMSC核心转录因子-2(Runt-related transcription factor 2,RUNX2)、骨钙素（Osteocalcin）和骨桥蛋白（Osteopontin）的荧光表达量。结果：在缺氧成骨分化培养条件下，1.00%CPO-PCL微粒显著促进细胞增殖（P <0.05）,0.50%和1.00%CPO-PCL微粒显著增加ADMSC ALP和钙结节生成量（P <0.001），促进RUNX2、Osteocalcin和Osteopontin蛋白表达（P <0.05）。在缺氧正常培养条件下，1.00%CPO-PCL微粒增加ADMSC ALP含量，促进RUNX2、Osteocalcin和Osteopontin蛋白表达（P <0.05）。在常氧成骨分化培养条件下，1.00%CPO-PCL微粒增加ALP和钙结节生成量，0.50%和1.00%CPO-PCL微粒促进RUNX2、Osteocalcin蛋白表达（P <0.001）。在常氧正常培养条件下，0.50%和1.00%CPO-PCL微粒促进RUNX2、Osteocalcin和Osteopontin蛋白表达（P <0.05），但对细胞成骨分化无显著影响。结论：1.00%CPO-PCL微粒在缺氧成骨分化培养条件下能够促进ADMSC体外增殖及成骨分化。

关键词

CPO-PCL微粒 / ADMSC / 成骨分化 / 细胞增殖 / 缺氧