不同性别来源人胚胎干细胞与羊膜间充质干细胞外泌体蛋白质组学与miRNA谱分析

摘要

目的：探讨不同性别来源人胚胎干细胞外泌体（human embryonic stem cell-derived exosome,hESC-exo）和人羊膜间充质干细胞外泌体（human amniotic mesenchymal stem cell-derived exosome,hAMSC-exo）在蛋白质组学和转录组学层面的差异。方法：构建符合外泌体研究的培养体系，通过超速离心分别从男女株人胚胎干细胞（human embryonic stem cell,hESC）和人羊膜间充质干细胞（human amniotic mesenchymal stem cell,h AMSC）中获得质量符合研究要求的外泌体（exosome,exo），采用液相色谱-串联质谱（liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS）分析来定义蛋白质组学表征，进行高通量测序以确定微小RNA(microRNA,miRNA)谱。通过生物信息学分析确定外泌体调控的主要生物学过程和通路。结果：在蛋白质组学和转录组学层面，hAMSC-exo男株与女株表征类似，而h ESC-exo男株与女株间存在较大差异。miRNA图谱和蛋白质组分析揭示了hESC-exo主要与发育、代谢相关，hAMSC-exo主要与免疫、代谢相关。结论：通过蛋白质组学和miRNA测序对不同性别来源的hAMSC-exo和hESC-exo进行了系统分析，预测它们的生物学功能，揭示其在不同领域的应用潜力，为临床前和临床试验中选择更优来源细胞提供新的视角。

关键词

外泌体 / 人羊膜间充质干细胞 / 人胚胎干细胞 / miRNA / 蛋白质组

基金资助

国家重点研发计划（2022YFC2702505）