液液萃取联合葡聚糖凝胶LH-20分离制备香烟烟雾中的5-羟甲基-2-糠醛

摘要

目的：从香烟烟雾中分离新的重要组分5-羟甲基-2-糠醛（5-hydroxymethyl-2-furfural,5-HMF），为评价其在吸烟所致呼吸系统损伤中的作用提供保证。方法：采用液液萃取与葡聚糖凝胶LH-20柱层析相结合的方法，对溶于三氯甲烷的香烟烟雾总提物（cigarette smoke extract,CSE）进行5-HMF的提取。首先将溶于三氯甲烷的CSE用双蒸水进行两次液液萃取，将5-HMF从三氯甲烷转移至水相，随后采用葡聚糖凝胶LH-20进行5-HMF的分离。提取及分离过程的效果采用高效液相色谱-紫外检测法（high performance liquid chromatography-ultraviolet detection,HPLC-UV）进行分析。采用GraphPad Prism软件进行双因素方差分析（two-way ANOVA）和Tukey’s多重比较检验，以评估方法的稳定性和可重复性。结果：两次液液萃取可将CSE中约92.18%的5-HMF转移至水相；葡聚糖凝胶LH-20可分离回收水相中约94.88%的5-HMF。3次独立重复实验的变异系数为8.53%，且双因素方差分析表明，虽然不同香烟样本间存在微小差异（P<0.01），但5-HMF的洗脱分布规律高度一致（洗脱管数因素P<0.000 1），占总变异的97.04%，证实了方法具有良好的可重复性。从含量上计算，该方法最终能分离CSE中约89.55%的5-HMF，且CSE中的尼古丁组分不会对5-HMF的分离造成干扰。结论：本研究实现了香烟烟雾中5-HMF的简单、快速、高效、稳定的分离，不仅为后续系统性研究香烟烟雾重要组分的毒效应提供物质和技术保证，也为香烟烟雾复杂基质中其他组分的分离制备提供了方法及思路。

关键词

液液萃取 / 葡聚糖凝胶LH-20 / 香烟烟雾 / 5-羟甲基-2-糠醛

基金资助

国家自然科学基金（82173562）; 南京医科大学常州医学中心重点项目（CMCM202315）;南京医科大学大型仪器共享服务项目（XZ103Q20200825）