IFN-γ通过抑制SRC/Areg信号轴减轻克罗恩病肠纤维化

摘要

目的：系统探讨干扰素-γ(interferon-gamma,IFN-γ)在克罗恩病（Crohn's disease,CD）肠纤维化中的调控作用及机制。方法：提取分离CD患者肠成纤维细胞，体外予以不同的细胞因子[20 ng/mL干扰素-γ(interferon-gamma,IFN-γ)、50 ng/mL白介素（interleukin,IL）-17A、10 ng/mL IL-1β、100 ng/mL IL-33、200 ng/mL IL-36α、20 ng/mL肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor,TNF）-α]处理48 h,RT-PCR检测人肠成纤维细胞中双调蛋白（amphiregulin,Areg）基因表达水平。20 ng/mL IFN-γ处理人肠成纤维细胞48 h后，进行转录组测序（RNA-seq），结合STRING数据库构建蛋白质互作（protein-protein interaction,PPI）网络。免疫荧光检测α平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin,α-SMA）、抗原Kiel 67(antigen Kiel 67,Ki67)等肌成纤维细胞标志物，评估IFN-γ对人肠道成纤维细胞活化、增殖的影响。结果：Areg显著促进肠成纤维细胞活化、增殖及胶原合成；IFN-γ可显著抑制肠成纤维细胞Areg表达，并下调α-SMA、COL1A1和COL6A1等纤维化相关基因，同时IFN-γ抑制成纤维细胞增殖与活化能力。RNA-seq分析发现IFN-γ调控的差异基因显著富集于细胞外基质（extracellular matrix,ECM）重构通路，蛋白互作（protein-protein interaction,PPI）网络鉴定出肉瘤原癌基因（sarcoma proto-oncogene,SRC）为核心节点，提示其可能介导IFN-γ的抗纤维化作用。结论：Areg是促CD肠纤维化关键介质，IFN-γ通过转录调控抑制Areg表达，并发现SRC可能是IFN-γ下游的关键效应分子。IFN-γ可能通过抑制SRC/Areg信号轴来发挥其抗纤维化作用。这些发现为开发靶向IFN-γ/SRC/Areg通路的抗纤维化策略提供了理论依据。

关键词

IFN-γ / 双调蛋白 / 肠成纤维细胞 / 克罗恩病 / 肠纤维化