全人源抗大别班达病毒抗体的制备及功能鉴定

摘要

目的：从发热伴血小板减少综合征（severe fever with thrombocytopenia syndrome,SFTS）恢复期患者的外周血单核细胞（peripheral blood mononuclear cell,PBMC）中，获得大别班达病毒（Dabie bandavirus,DBV）特异性抗体序列，制备全人源DBV抗体。方法：用酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）检测恢复期患者血浆抗体效价，挑取恢复期患者PBMC样本进行磁珠富集，经流式细胞仪分选获得能够结合DBV糖蛋白的特异性单个B细胞，经B细胞受体（B cell receptor,BCR）测序获得抗体序列，进行单链抗体的原核表达，采用蛋白免疫印迹、ELISA和体外中和实验鉴定抗体的表达、结合能力和中和活性。结果：共收集25例SFTS恢复期患者血液样本，血浆中均发现了DBV糖蛋白和核衣壳蛋白的抗体。选取样本进行流式分选和BCR测序，分析后共获得6个单链抗体，对DBV均具有良好的结合能力和中和活性。结论：成功表达了6个与DBV具有中和作用的全人源抗DBV抗体。

关键词

发热伴血小板减少综合征 / 大别班达病毒 / 恢复期患者 / 全人源抗体