PTPN6在胃癌中的作用及对NK细胞介导杀伤活性的影响

摘要

目的：探究蛋白酪氨酸磷酸酶非受体型6(tyrosine protein phosphatase non-receptor type 6,PTPN6)在胃癌组织中的表达特征，评估其与自然杀伤（natural killer,NK）细胞浸润与活化的相关性，并进一步阐明PTPN6对胃癌细胞增殖等恶性表型及NK细胞杀伤活性的调控作用和分子机制。方法：基于亚洲癌症研究组（Asian Cancer Research Group,ACRG）及整合单细胞数据，分析PTPN6在胃癌组织中的表达水平，及其与NK细胞浸润和活化水平的相关性；采用CCK-8、EdU、克隆形成及Transwell实验评估沉默或过表达PTPN6对MKN1和AGS细胞增殖、迁移和侵袭的影响；通过流式细胞术检测各组细胞凋亡水平和NK细胞介导的杀伤效率；通过qRT-PCR检测各组细胞人类白细胞抗原-Ⅰ类（human leukocyte antigen-classⅠ，HLA-Ⅰ）分子的表达水平；通过全外显子测序评估胃癌类器官与原发组织在基因组层面的相似性，通过胃癌类器官和NK细胞共培养模型评估NK细胞杀伤效率；构建PTPN6过表达的YTN16胃癌细胞系，在NCG鼠和C57BL/6鼠中进行皮下荷瘤，通过流式细胞术对肿瘤浸润NK细胞进行分析；通过转录组测序鉴定PTPN6调控的潜在下游分子和信号通路。结果：PTPN6在胃癌组织中表达显著上调，且与NK细胞的浸润和活化水平呈显著负相关；敲低PTPN6可抑制胃癌细胞增殖能力，增强NK细胞杀伤敏感性，并下调HLA-Ⅰ类分子表达；过表达PTPN6则促进胃癌细胞恶性表型，减弱NK细胞杀伤活性，同时上调HLA-Ⅰ类分子表达；小鼠荷瘤体内实验显示，过表达PTPN6可加速C57BL/6小鼠肿瘤生长，并使肿瘤组织的NK细胞浸润比例减少；转录组测序分析表明PTPN6过表达激活PI3K/AKT、MYC和NF-κB等信号通路。结论：PTPN6在胃癌中高表达，通过激活PI3K/AKT等信号通路促进肿瘤细胞增殖和侵袭；其表达与NK细胞浸润和活化水平呈负相关，可通过调控胃癌细胞HLA-Ⅰ类分子表达介导免疫逃逸。

关键词

胃癌 / NK细胞 / PTPN6