tRF-AsnGTT-33减轻阿霉素肾病小鼠足细胞损伤的机制研究

摘要

目的：探讨tRNA衍生片段AsnGTT-33(tRNA-derived fragment AsnGTT-33,tRF-AsnGTT-33)在阿霉素（adriamycin,ADR）肾病小鼠足细胞损伤中的作用和机制。方法：尾静脉一次性注入ADR(10 mg/kg)，构建ADR肾病小鼠模型，尾静脉注射tRF-AsnGTT-33腺相关病毒（adeno-associated virus,AAV）0.5 mL/只实现体内过表达，采用肌氨酸氧化酶法检测小鼠血清肌酐（serum creatinine,Scr）、脲酶法检测血尿素氮（blood urea nitrogen,BUN）、苏木精和伊红染色（hematoxylin and eosin staining,HE）和过典酸-雪芙染色（periodic acid-schiff stain,PAS）观察肾小球及肾小管损伤程度，并通过qPCR和Western blot分析足细胞标志物Nephrin和Podocin的表达变化。体外以1 mg/L ADR诱导足细胞损伤，转染t RF-AsnGTT-33 mimic后，通过qPCR和Western blot检测细胞内nephrin和podocin表达变化。基于miRDB数据库预测RAB21为靶基因，检测足细胞及小鼠肾脏组织中tRFAsnGTT-33过表达对RAB21表达的影响。结果：ADR肾病小鼠肾组织t RF-AsnGTT-33表达显著下调，伴随Scr、BUN升高，nephrin和podocin表达降低，肾脏病理损伤加重，如肾小球基底膜增厚、肾小管内可见蛋白管型、间质纤维化等；tRF-AsnGTT-33过表达可显著降低Scr及BUN水平，减轻病理损伤，上调Nephrin和Podocin的表达。ADR诱导的足细胞中tRF-AsnGTT-33表达下调，且Nephrin和Podocin表达下降，tRF-AsnGTT-33过表达后Nephrin和Podocin表达升高。tRF-AsnGTT-33过表达后足细胞及小鼠肾脏组织中RAB21表达均显著下调。结论：tRF-AsnGTT-33可能通过靶向调控RAB21减轻ADR诱导的足细胞损伤，为寻找慢性肾脏病治疗靶点提供理论依据。

关键词

阿霉素肾病 / 足细胞 / 细胞凋亡 / tRF-AsnGTT-33 / RAB21