MiR-21靶向PDCD4调控骨肉瘤MG63细胞的增殖、凋亡和侵袭

摘要

目的 微小RNA (miRNA)是一种大小约20～25个碱基的单链内源性小分子非编码RNA,在转录水平上对潜在靶点mRNA的表达进行调控。miRNA在许多恶性肿瘤中异常表达，这与肿瘤的发生发展密切相关，起到原癌基因或致癌基因的作用。研究发现，microRNA-21 (miR-21)是许多癌症中最常见的致癌基因之一。然而，miR-21在骨肉瘤中的功能尚未完全阐明。本研究拟探讨miR-21对骨肉瘤MG63细胞增殖、侵袭和凋亡的影响及其作用机制。方法 使用生物信息学预测miR-21的潜在靶基因。通过实时定量PCR和Western blot法分别检测骨肉瘤MG63细胞中miR-21和程序性细胞死亡因子4(PDCD4)的表达水平。通过上调或抑制miR-21表达，检测细胞活力、细胞周期、凋亡相关生物学功能，双荧光素酶报告基因验证miR-21与PDCD4的靶向关系。结果 生物信息学预测人类PDCD4基因的3′-UTR区含有多个潜在的miRNA靶位点。实时定量PCR结果显示，miR-21表达水平在pcDNA3.1-miR-21组中高于pcDNA3.1组和balnk组。与blank组相比，miR-21的上调显著促进了骨肉瘤MG63细胞增殖、侵袭，同时抑制了细胞凋亡。荧光素酶报告基因实验证实PDCD4是miR-21的直接靶基因，miR-21与PDCD4呈负相关。结论 上调miR-21的表达通过抑制骨肉瘤MG63细胞内源性PDCD4水平促进细胞增殖、侵袭和抑制细胞凋亡，下调miR-21的表达抑制骨肉瘤MG63细胞增殖、侵袭和促进细胞凋亡。因此，miR-21可能在骨肉瘤的发展过程中发挥致癌作用，并可能成为有效的治疗靶点。

关键词

骨肉瘤 / PDCD4 / miR-21 / 增殖 / 凋亡 / 侵袭