四妙汤对类风湿关节炎大鼠维生素D系统及中性粒细胞胞外诱捕网的影响研究

摘要

背景 随着我国进入人口老龄化加速发展期，类风湿关节炎（RA）患病比例不断增加，给社会和家庭造成沉重负担。四妙汤中药物的有效成分确有改善RA的作用，但分析方剂的作用及机制缺乏相关研究。目的 观察四妙汤对胶原诱导法建立的类风湿关节炎大鼠的干预效果及其对维生素D系统及中性粒细胞胞外诱捕网（NETs）的影响。方法 2021年11月—2023年1月选取SD雌性大鼠70只，采用随机数字表法将大鼠分为空白组（Control组）、模型组（Model组）、甲氨蝶呤组（MTX组）、维生素D组（VD组）、四妙汤低剂量组（SMT-L组）、四妙汤中剂量组（SMT-M组）、四妙汤高剂量组（SMT-H组），每组10只。通过胶原诱导法建立滑膜型关节炎大鼠模型，于造模7 d后开始灌胃治疗。观察药物干预前后大鼠踝部肿胀程度，测量关节炎指数（AI）评分。采用免疫组化法检测滑膜组织髓过氧化物酶（MPO）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）表达情况，检测大鼠血清中白介素6（IL-6）、25-羟基维生素D₃[25（OH）D₃]、NETs水平，检测关节滑膜组织24-羟基化酶（CYP24A1）、1-α羟化酶（CYP27B1）、MPO、维生素D受体（VDR）、弹性蛋白酶（NE）表达水平。结果 药物干预第第7天Control组、MTX组、VD组、SMT-L组、SMT-M组、SMT-H组踝部肿胀程度低于Model组，第14天Model组踝部肿胀程度高于Control组，SMT-M组踝部肿胀程度高于Model组，第21天Model组踝部肿胀程度高于Control组、MTX组，低于VD组、SMT-L组、SMT-M组、SMT-H组，第28天Control组、MTX组、VD组、SMT-L组、SMT-M组、SMT-H组踝部肿胀程度低于Model组（P<0.05）。第14天SMT-H组大鼠AI评分低于Model组，第21天MTX组、VD组、SMT-L组、SMT-H组AI评分低于Model组，第28天MTX组、VD组、SMT-L组、SMT-M组、SMT-H组AI评分低于Model组（P<0.05）。7组大鼠滑膜组织MPO、TNF-α表达水平比较，差异有统计学意义（P<0.05），其中Model组MPO、TNF-α高于Control组，MTX组、VD组、SMT-H组MPO、TNF-α低于Model组，SMT-M组TNF-α低于Model组（P<0.05）。Model组IL-6、NETs高于Control组，25（OH）D₃低于Control组；MTX组、VD组、SMT-H组IL-6、NETs低于Model组，25（OH）D₃高于Model组；SMT-M组NETs低于Model组（P<0.05）。Model组CYP24A1高于Control组、MTX组、VD组、SMT-M组、SMT-H组，CYP27B1、VDR低于Control组、MTX组、VD组、SMT-M组、SMT-H组，MPO高于Control组、MTX组、VD组、SMT-L组、SMT-M组、SMT-H组，NE高于Control组、VD组、SMT-M组、SMT-H组（P<0.05）。结论 四妙汤可能通过调控维生素D系统抑制NETs的形成，进而治疗RA。

关键词

类风湿关节炎 / 四妙汤 / 维生素D / 维生素D系统 / 中性粒细胞胞外诱捕网