左慈丸的化学成分及治疗围绝经期听力损失的作用机制研究：基于网络药理学与分子对接技术

摘要

背景 近年来，围绝经期听力损失（PMS-HL）症状得到普遍关注，但无针对性治疗。左慈丸治疗耳聋已有百年历史，但尚无该药治疗PMS-HL的相关研究。目的 在网络药理学和分子对接技术的基础上，进一步通过动物实验验证，初步探讨左慈丸对PMS-HL的作用机制及治疗靶点。方法 检索数据库时限均为建库至2023年2月。根据左慈丸的组方，通过TCMSP和Uniprot数据库挖掘该药物活性成分和作用靶点，根据GeneCards、OMIM、TTD、DrugBank、PharmGKB数据库获取PMS-HL的蛋白靶点，取其交集，筛选左慈丸治疗PMS-HL的潜在治疗靶点，构建“药物-活性成分-靶点”相互作用网络图。利用String数据库的蛋白相互作用分析功能筛选核心靶点。采用Metascape数据库对蛋白的功能及其通路进行富集分析。使用Autodock和Pymol对核心蛋白进行分子对接，确定核心靶点与左慈丸的关键活性成分之间的结合能力。于2022年9月—2023年1月建立绝经大鼠模型：假手术组（SHAM）组、去卵巢组（OVX）组、左慈丸（ZCW）组，并检测血清中关键蛋白白介素1β(IL-1β)水平，使用SPSS 26.0进行统计分析。结果 左慈丸组方中化合物的活性成分90个，潜在蛋白靶点226个，PMS-HL相关靶点2 481个，左慈丸与PMS-HL交集靶点150个。基因本体论（GO）功能中获得生物过程共183个条目，分子功能103个条目，细胞成分103个条目；京都基因和基因组百科全书（KEGG）前三位分别是癌症通路、脂质与动脉粥样硬化病变通路和化学致癌的受体激活通路。分子对接显示，左慈丸治疗PMS-HL的主要活性成分有槲皮素、山柰酚、豆甾醇、β-谷甾醇、异鼠李素、薯蓣皂苷、四氢鸭脚木碱和海风藤酮；左慈丸的活性成分与核心靶蛋白：丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1(AKT1)、细胞肿瘤抗原p53(TP53)、白介素6(IL-6)、血管内皮生长因子（VEGFA）、胱天蛋白酶3(CASP3)、IL-1β、表皮生长因子受体（EGFR）、雌激素受体1(ESR1)结合能稳定。3组大鼠血清IL-1β水平比较，差异有统计学意义（F=11.73,P<0.001）。结论 左慈丸中的槲皮素等90个活性成分通过作用于AKT1等226个潜在蛋白，实现调控组织细胞的抗氧化应激、调节血脂血糖代谢、抗肿瘤等途径，直接或间接地起到保护围绝经期听力功能的作用，IL-1β可能是其中发挥作用的关键靶蛋白。

关键词

围绝经期 / 听力损失 / 左慈丸 / 中药化学成分 / 网络药理学 / 分子对接

基金资助

国家自然科学基金青年基金资助项目（82004409）; 天津市医学重点学科（专科）建设项目（TJYXZDXK-039A）; 北京市自然科学基金资助项目（7202075）