石见穿诱导铁死亡抑制小鼠食管癌发生发展的研究

摘要

背景食管癌是一种在中国乃至全球范围内常见的消化道恶性肿瘤，具有很高的发病率和致死率。石见穿（SJC）作为传统中药，其清热解毒、活血镇痛之功常用于食管癌的治疗中。药理实验研究证明，SJC具有抗癌性，可有效治疗多种恶性肿瘤。目的 基于铁死亡探讨SJC抑制C57小鼠食管原位癌发生发展的作用和机制。方法 2022年2月—2023年2月选取SPF级C57BL/6雌鼠90只，随机分为对照组（Control组，n=15）、单纯4NQO诱癌组（4NQO组，n=25）、4-硝基喹啉N-氧化物（4NQO）+SJC低剂量组[4NQO/SJC（91 mg）组，n=25]和4NQO+SJC高剂量组[4NQO/SJC（182 mg）组，n=25]。采用4NQO诱导的方式进行C57小鼠食管癌原位模型的制备。观察小鼠活动情况，记录其精神状况和进食饮水情况，每隔8周分组测量小鼠体质量并进行记录。32周后进行食管组织苏木素-伊红（HE）染色和病理学分析。测定食管组织Fe²⁺、谷胱甘肽（GSH）和丙二醛（MDA）含量，采用蛋白质印迹法检测小鼠食管组织中核受体共激活因子4（NCOA4），谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）蛋白质的表达水平。采用KaplanMeier法绘制小鼠的生存曲线，生存曲线的比较采用Breslow检验。结果 造模8、16、24、32周4NQO组、4NQO/SJC（91 mg）组、4NQO/SJC（182 mg）组小鼠体质量低于Control组，32周4NQO/SJC（91 mg）组、4NQO/SJC（182 mg）组小鼠体质量高于4NQO组（P<0.05）。Breslow检验结果显示，4组小鼠生存曲线比较，差异有统计学意义（χ2=9.907,P=0.019）。HE染色结果可见，4NQO组小鼠食管上皮组织呈现异常增生，细胞排列紊乱，出现角化珠等异常病理改变；与4NQO组比较，4NQO/SJC（91 mg）组和4NQO/SJC（182 mg）组食管上皮组织病理学改变明显改善。4NQO组、4NQO/SJC（91 mg）组、4NQO/SJC（182 mg）组Fe²⁺、MDA均低于Control组，GSH均高于Control组（P<0.05）;4NQO/SJC（91 mg）组、4NQO/SJC（182 mg）组Fe²⁺、MDA均高于4NQO组，GSH均低于4NQO组（P<0.05）;4NQO/SJC（182 mg）组Fe²⁺、MDA均高于4NQO/SJC（91 mg）组，GSH均低于4NQO/SJC（91 mg）组（P<0.05）。4NQO组NCOA4低于Control组、4NQO/SJC（91 mg）组、4NQO/SJC（182 mg）组，GPX4高于Control组、4NQO/SJC（91 mg）组、4NQO/SJC（182 mg）组（P<0.05）;4NQO/SJC（91 mg）组、4NQO/SJC（182 mg）组GPX4高于Control组（P<0.05）。结论 SJC可干预食管癌的发生发展，其机制可能与NCOA4介导的铁蛋白吞噬作用相关。

关键词

食管癌 / 铁死亡 / 石见穿 / 原位癌诱导模型 / 谷胱甘肽过氧化物酶4 / 核受体共激活因子4