黄精丸的配伍提取液对学习记忆障碍大鼠海马齿状回区干细胞影响的研究

摘要

背景 阿尔茨海默病（AD）是一类以学习记忆障碍为主的神经退行性疾病，给家庭和社会造成了沉重负担。中医药在防治AD方面具有重要潜力，当前应积极从中医药宝库中挖掘有效治疗方药。目的 探讨古代名方黄精丸的配伍提取液（CHP）对D-半乳糖联合东莨菪碱所致学习记忆障碍大鼠海马齿状回（DG）区干细胞增殖的影响。方法 2023年1—12月选取90只雄性SD大鼠，随机分成正常对照组、AD模型组、多奈哌齐组、黄精丸配伍低、中、高剂量组，每组15只。制备CHP，通过皮下注射1%D-半乳糖液+东莨菪碱制备AD大鼠模型，多奈哌齐组给予0.5mg·kg-1·d-1多奈哌齐灌胃，黄精丸配伍低、中、高剂量组分别给予1、3、9 g·kg-1·d-1剂量的黄精丸配伍提取液灌胃，共干预8周。通过跳台实验检测学习、记忆能力。取材后采用实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-q PCR）检测大鼠海马细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、巢蛋白（Nestin）m RNA表达水平，采用免疫印迹法（Western blot）检测大鼠Cyclin D1、Nestin蛋白表达水平。通过5-溴-2-脱氧尿嘧啶核苷（Brd U）免疫组化、免疫荧光检测免疫阳性细胞数量。结果 跳台实验结果显示AD模型组较正常对照组大鼠反应时间延长，跳台学习成绩与跳台记忆成绩的错误次数增多，潜伏时间缩短；多奈哌齐组及CHP各剂量组较AD模型组大鼠跳台学习成绩的反应时间及错误次数、跳台记忆成绩的错误次数均减少，潜伏时间增加（P<0.05）。RT-q PCR结果显示AD模型组较正常对照组的大鼠海马Cyclin D1、Nestin m RNA表达水平降低，多奈哌齐组及CHP各剂量组较AD模型组大鼠海马Cyclin D1、Nestin m RNA表达水平均升高，CHP高剂量组Cyclin D1、Nestin m RNA表达水平高于正常对照组（P<0.05）。Western blot结果显示AD模型组较正常对照组的大鼠海马Cyclin D1、Nestin蛋白表达水平降低，多奈哌齐组及CHP各剂量组较AD模型组的大鼠海马Cyclin D1、Nestin蛋白表达水平均升高，CHP高剂量组Cyclin D1、Nestin蛋白表达水平高于正常对照组（P<0.05）。Brd U免疫组化、免疫荧光结果显示AD模型组较正常对照组的大鼠海马DG区阳性细胞数量均明显减少；多奈哌齐组及CHP各剂量组较AD模型组的大鼠海马DG区阳性细胞数量均明显增多，CHP中、高剂量组阳性细胞数量高于正常对照组（P<0.05）。结论 CHP可促进学习记忆障碍大鼠海马神经干细胞增殖，促进海马神经功能恢复进而改善AD认知障碍，具有临床推广价值。

关键词

阿尔茨海默病 / 记忆障碍 / 黄精丸 / 齿状回 / 神经干细胞

基金资助

江西省中医药管理局科技计划重点项目（2020Z006）; 江西省教育厅科技项目（GJJ190638）; 江西中医药大学校级硕士研究生创新专项资金项目（JZYC22S14,JZYC21S59）;江西中医药大学中西医结合一级学科（江西省双一流学科）（zxyylxk20220103）