自噬相关蛋白Beclin-1及微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ在肺癌转移性胸腔积液中的表达研究

摘要

背景 恶性胸腔积液是肿瘤晚期以及转移的重要标志之一，现有诊断胸腔积液性质的相关方法存在缺陷与不足，无法对胸腔积液的性质进行及时有效的判断。多数恶性胸腔积液是由转移性肺癌引起，自噬相关蛋白1(Beclin-1)及用于监测细胞自噬水平的微管相关蛋白1轻链3(LC3)-Ⅱ在肺癌疾病进程中有重要作用，但在转移性胸腔积液中应用的相关报道较少，仍需进一步研究。目的 分析自噬相关蛋白Beclin-1及LC3-Ⅱ在肺癌转移性胸腔积液中的表达情况，探讨其在临床疾病早期诊断中的价值。方法 2022年5月—2023年7月利用GEO数据库、GEPIA2及GeneMANIA数据库分析获得Beclin-1及LC3的生物信息；收集包头医学院第一附属医院检验科细胞室自2018—2023年未经任何临床治疗患者的胸腔积液，通过液基薄层细胞涂片并结合其临床资料对收集的胸腔积液进行分组，将其分为恶性测定组（95例）及良性对照组（190例），通过RT-PCR方法及Western Blotting方法分别检测Beclin-1、LC3-Ⅱ基因及蛋白水平表达，并利用免疫荧光试验确认LC3-Ⅱ蛋白的表达数量。结果 生物信息学分析结果显示，Beclin-1与LC3-Ⅱ均存在于肺癌差异表达基因数据集中，在肺癌组织与正常组织中表达具有差异性；RTPCR结果显示Beclin-1与LC3-Ⅱ的基因表达在良性对照组中均高于恶性测定组（P<0.05）;Western Blotting结果中Beclin-1与LC3-Ⅱ的蛋白表达在良性对照组较恶性测定组高（P<0.05）；此外在良性对照组中异硫氰酸荧光素标记的代表自噬体数量的LC3-Ⅱ荧光斑点较恶性测定组高。结论 通过分析自噬相关蛋白Beclin-1及LC3-Ⅱ在良性胸腔积液及肺癌转移性恶性胸腔积液中的表达差异，可用于恶性胸腔积液的早期诊断，为良恶性胸腔积液的鉴别诊断与针对性治疗提供新的视角。

关键词

肺肿瘤 / 胸腔积液 / 自噬 / Beclin-1 / LC3-Ⅱ