GJA3基因突变介导细胞凋亡引起遗传性白内障机制研究

摘要

目的：前期研究证实，缝隙连接蛋白基因46(GJA3)的第187位氨基酸由脯氨酸突变为丝氨酸即GJA3 (p.P187S)是一遗传性白内障致病基因，本研究旨在对该基因突变进行功能分析及凋亡机制研究。方法：构建野生型GJA3和突变型GJA3 (p.P187S)真核表达载体，分别转染人宫颈癌细胞(Hela)细胞进行表达，比较两组缝隙连接盘的表达差异；运用Western-Blot方法分析两组蛋白表达水平上的差异；通过TUNEL染色及流式细胞技术检测两组凋亡率差异。结果：GJA3和突变型GJA3 (p.P187S)组缝隙连接盘形态观察发现无明显差异。两组蛋白的表达水平无明显差异。凋亡检测结果显示GJA3 (p.P187S)突变体组凋亡率较高。结论：GJA3(p.P187S)突变未影响GJA3蛋白的表达水平、蛋白亚细胞定位及缝隙连接盘形成，但可引起细胞凋亡率上升。这提示异常凋亡可能为GJA3 (p.P187S)突变导致遗传性白内障的致病机制，验证这一点需进一步研究工作的开展。

关键词

遗传性白内障 / 缝隙连接蛋白 / 基因突变