NT5DC2抑制肝细胞癌发生铁死亡的机制研究

摘要

目的：探讨5'-核酸酶结构域包含蛋白2(5'-nucleotidase domain-containing 2,NT5DC2)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)铁死亡中的作用以及相关机制。方法：通过HPA数据库中分析肝癌及正常肝组织的免疫组化结果。通过TCGA数据库比较肝细胞癌和正常组织中NT5DC2的转录水平。采用Kaplan-Meier法分析了肝癌患者组织中NT5DC2的表达水平与术后总体生存时间的关系。RT-qPCR实验和Western Blot实验检测敲低NT5DC2效率和溶质载体家族7成员11(recombinant solute carrier family 7, member 11,SLC7A11)、谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)和P53 mRNA或蛋白表达的影响。通过DCFH-DA探针法检测细胞内ROS水平。GSH-PX试剂盒检测细胞内GSH-PX水平的影响。结果：在TCGA数据库发现NT5DC2在肝细胞癌高表达，HPA数据库显示NT5DC2在肝癌中高表达，在正常肝组织中低表达，KM曲线表明高表达NT5DC2的患者比低表达的患者的预后明显不良。敲低NT5DC2可以减少SLC7A11、GPX4的mRNA和蛋白水平(P<0.05),增加P53的mRNA和蛋白水平(P<0.05);降低Huh7细胞内的ROS水平和GSH-PX水平(P<0.05)。共转染siNT5DC2和siP53组与siNT5DC2组相比，HCC细胞的SLC7A11和GPX4的mRNA和蛋白质水平有所恢复(P<0.05),表明NT5DC2通过P53调控HCC细胞发生铁死亡。结论：NT5DC2可以通过P53/SLC7A11/GPX4通路抑制肝细胞癌发生铁死亡。

关键词

肝细胞癌 / 铁死亡 / NT5DC2