槲皮素通过Nrf2/HO-1通路改善血管紧张素Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞表型转化

摘要

目的 探讨槲皮素（quercetin, QR）对血管紧张素Ⅱ（angiotensinⅡ, AngⅡ）诱导的血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells, VSMCs）损伤和表型转化的保护作用及机制。方法 用AngⅡ处理VSMCs，并分为4组：空白对照组（Ctrl组）、QR对照组（QR组）、模型组（AngⅡ组）、QR治疗组（AngⅡ+QR组）。检测细胞内活性氧（reactive oxygen species, ROS）水平和超氧化物歧化酶（superoxide dismutase, SOD）活性。采用蛋白质印迹法检测炎症、细胞凋亡、细胞外基质重塑、表型转化及核因子E2衍生相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)信号通路相关蛋白表达。采用实时荧光定量反转录聚合酶链反应检测炎症因子[白介素（interleukin, IL）1β、IL-6和肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)]的转录水平。采用划痕实验检测细胞迁移能力。用Nrf2转录活性抑制剂ML385进行挽救实验，验证QR对VSMCs的保护机制。结果 与Ctrl组相比较，AngⅡ组细胞的ROS水平更高，SOD活性被抑制，炎症相关蛋白表达上调，炎症因子mRNA水平增高，基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase,MMP）表达升高（P<0.05）,VSMCs的迁移能力增强，收缩表型标志物平滑肌相关蛋白22α(smooth muscle 22α,SM22α)和α平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin, α-SMA）表达减少，分泌表型标志物骨桥蛋白（osteopontin, OPN）表达上调，细胞凋亡增加（P<0.05）。QR干预后，细胞内ROS水平明显降低，SOD活性增高，血管细胞黏附分子1和磷酸化核因子κB的蛋白表达下降，炎症因子的转录水平下降，收缩表型标志物表达上调，细胞凋亡和迁移能力减弱（P<0.05）。挽救试验证实，QR通过激活Nrf2，减轻VSMCs氧化应激和炎症相关损伤，并抑制VSMCs向合成型转化。结论 QR通过促进Nrf2的表达，减轻AngⅡ诱导的VSMCs氧化应激、炎症和凋亡，抑制细胞外基质重塑和VSMCs迁移，从而抑制VSMCs表型转化。

关键词

槲皮素 / 颅内动脉瘤 / 血管平滑肌细胞 / 氧化应激 / 表型转化 / 核因子E2衍生相关因子2