心脏靶向脂质体通过促进炎症消退改善心肌缺血再灌注损伤

摘要

目的 探讨心脏靶向肽修饰的包载消退素D1(resolvin D1, RvD1)的活性氧（reactive oxygen species, ROS）响应性脂质体（C-LP-RvD1）对心肌缺血再灌注（myocardial ischemia-reperfusion, MI/R）损伤的促炎症消退及保护作用。方法 构建C-LP-RvD1纳米脂质体并进行理化表征与体外释放评估。无靶向肽修饰的载药脂质体（LP-RvD1）作为对照。采用凋亡的成年小鼠原代心肌细胞（adult mouse cardiomyocytes, AMCMs）验证C-LP-RvD1的体外靶向结合能力。在MI/R损伤小鼠模型中评估C-LP-RvD1的体内分布与心脏富集情况。采用酶联免疫吸附测定（enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA）检测心脏组织匀浆与体外细胞培养基中的特异性促炎症消退介质（specialized pro-resolving mediator, SPM）及炎症因子水平。采用超声心动图与Masson染色评估脂质体治疗4周后的心功能与纤维化重构。在注射C-LP-RvD1的健康小鼠中评估其生物安全性。结果 C-LP-RvD1具有良好的纳米尺度均一性与稳定性，表现出ROS触发的加速释放特征。体外实验显示，C-LP-RvD1组与凋亡AMCMs的结合能力高于LP-RvD1组，且SMP水平更高（P<0.01），炎症因子水平更低（P<0.05）。体内实验显示，C-LP-RvD1在MI/R损伤心脏富集增强，C-LP-RvD1组心肌局部SMP水平高于LP-RvD1组、炎症因子水平低于LP-RvD1组（P<0.05）。治疗4周后，与LP-RvD1组相比，C-LP-RvD1组小鼠心功能指标改善，心室纤维化重构比例降低（P<0.05）。安全性评估未见小鼠明显系统性炎症、免疫原性或凝血异常，肝肾功能及主要脏器组织学未见显著损伤。结论 C-LP-RvD1通过损伤靶向富集和ROS响应释放提高RvD1在MI/R损伤心脏的有效递送，促进炎症消退并抑制过度炎症，从而改善心功能并减轻不良重构，且具有良好生物安全性。

关键词

心肌缺血再灌注损伤 / 消退素D1 / 靶向递送 / 脂质体