CB2R调控小胶质细胞功能对小鼠孤独症样行为的影响

摘要

目的 探讨大麻素受体2（CB2R）对小胶质细胞活化和焦亡的调控作用，以及对小鼠孤独症样行为的影响，为ASD的病因学研究提供科学依据。方法 体外实验：将BV2小胶质细胞分为对照组、LPS组、AM1241组，采用RT-PCR法检测炎性因子mRNA表达水平，Western Blot法检测焦亡标记物蛋白表达。体内实验：自2023年10月—2024年7月，构建CB2R敲除鼠(CB2R^-/-),将8周龄的小鼠分为WT组和CB2R^-/-组，采用免疫荧光评估小胶质细胞活化情况，采用RT-PCR和Western Blot检测焦亡标记物mRNA和蛋白表达水平，通过旷场、自梳、埋珠、三箱实验来评估小鼠的焦虑样行为、重复刻板行为和社交功能。结果 体外实验：与对照组相比，LPS组促炎因子TNF-α、IL-6和CCL2的mRNA水平升高，抗炎因子Arg-1和IL-13的mRNA水平降低（P<0.05）;与LPS组相比，AM1241组TNF-α、IL-6和CCL2的mRNA水平降低，Arg-1、IL-10和IL-13的mRNA水平增加（P<0.000 1）。与对照组相比，LPS组中NLRP3、GSDMD、GSDMD-N、caspase-1和cleaved-caspase-1的蛋白表达明显增加，AM1241干预后，均显著降低（P<0.05）。体内实验：与WT小鼠相比，CB2R^-/-小鼠海马CA1、CA3区的CD86⁺/Iba1⁺比值升高，而CD206⁺/Iba1⁺比值降低（P<0.01）;NLRP3、GSDMD、caspase-1、IL-1β、IL-18的mRNA水平明显升高（t=2.20、3.12、2.55、2.54、2.30,P<0.05）;NLRP3、GSDMD、GSDMD-N、caspase-1和cleaved-caspase-1的蛋白表达明显增加（t=7.43、2.87、3.86、3.99、6.55,P<0.05）;移动距离、自梳时间和埋珠个数均显著升高，休息时间和社交偏好指数显著降低（P<0.05）。结论 CB2R参与调控小胶质细胞活化和焦亡，影响神经炎症反应，进而导致小鼠出现孤独症样行为，提示CB2R可能是ASD潜在治疗靶点。

关键词

大麻素受体2 / 孤独症谱系障碍 / 小胶质细胞活化 / 小胶质细胞焦亡 / 神经炎性反应

基金资助

国家自然科学基金(82073577); 黑龙江省普通本科高等学校青年创新人才计划(UNPYSCT-2020168)