Brg1调控Wnt/β-catenin信号通路在支气管肺发育不良模型中的作用

摘要

目的 探究Brahma相关基因1 (Brahma-related gene 1, Brg1)通过调控Wnt/β-联蛋白（β-catenin）信号通路在支气管肺发育不良（bronchopulmonary dysplasia, BPD）模型中的作用及机制。方法 将野生型C57BL/6及Brg1f1/f1小鼠随机分为野生型对照组、野生型BPD组、Brg1f1/f1对照组、Brg1f1/f1 BPD组（n=5）。培养永生化小鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞（immortalized mouse pulmonary alveolar type 2 cell, imPAC2），利用慢病毒转染技术敲低细胞Brg1基因，将细胞分为对照组、空载体组、Brg1敲低组。采用苏木精-伊红染色和免疫荧光检测小鼠肺组织病理改变，Western blot和实时荧光定量PCR检测小鼠肺组织Brg1蛋白和mRNA表达水平，Western blot和免疫荧光检测小鼠肺组织和imPAC2细胞中同源结构域蛋白（homeodomain-containing protein homeobox, HOPX）、表面活性蛋白C (surfactant protein C, SPC)、Wnt/β-catenin信号通路蛋白表达情况，CCK8法检测imPAC2细胞增殖情况以及免疫共沉淀验证imPAC2细胞中Brg1和β-catenin蛋白相互作用情况。结果 与Brg1f1/f1对照组、野生型BPD组比较，Brg1f1/f1 BPD组肺组织肺泡直径、SPC蛋白表达增加，肺血管相对密度、HOPX蛋白表达减少（P<0.05）。与对照组相比，Brg1敲低组细胞增殖能力和SPC、Wnt5a、β-catenin蛋白表达水平及β-catenin蛋白荧光强度升高，HOPX蛋白表达降低（P<0.05）;Brg1与β-catenin蛋白存在相互作用。结论 Brg1基因可能通过调控Wnt/β-catenin信号通路促进Ⅱ型肺泡上皮细胞增殖，从而影响BPD的发生发展。[中国当代儿科杂志，2025,27 (6):731-739]

关键词

支气管肺发育不良 / Brahma相关基因1 / Wnt/β-catenin信号通路 / Ⅱ型肺泡上皮细胞 / 小鼠