栀子苷通过激活SIRT3信号通路抑制铁死亡减轻内皮细胞炎症损伤的研究

摘要

目的 观察栀子苷（geniposide, GE）对脂多糖（lipopolysaccharide, LPS）诱导的人冠状动脉内皮细胞（human coronary artery endothelial cell, HCAEC）炎症损伤的作用及机制。方法 将HCAEC随机分为4组：对照组不予处理，模型组给予LPS（20 ng/mL）处理24 h,GE组给予GE（30μg/mL）预处理12 h后使用LPS（20 ng/mL）处理24 h，沉默信息调节因子3（silent information regulaton 3, SIRT3）抑制剂组给予GE（40μg/mL）与SIRT3特异性抑制剂3‑TYP共同预处理12 h后使用LPS（20 ng/mL）处理24 h。采用CCK‑8法检测细胞活力，试剂盒检测细胞培养基中乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase, LDH）活性及细胞中丙二醛（malondialdehyde,MDA）、谷胱甘肽（glutathione, GSH）、亚铁离子(Fe²⁺)水平，DCFH‑DA荧光探针法检测活性氧（reactive oxygen species, ROS）水平，Western blot法检测SIRT3、谷胱甘肽过氧化物酶4（glutathuone peroxidase 4, GPX4）、溶质载体家族7成员11（solute carrier family 7 member 11, SLC7A11）、转铁蛋白受体1（transferrin receptor 1, TfR1）蛋白表达水平，免疫荧光染色检测SIRT3表达。结果 与对照组相比，模型组细胞活力、GSH含量、SIRT3荧光强度及GPX4、SLC7A11、SIRT3蛋白表达降低（P<0.05）,LDH活性、TfR1蛋白表达及MDA、Fe²⁺、ROS含量升高（P<0.05）；与模型组相比，GE组细胞活力、GSH含量、SIRT3荧光强度及GPX4、SLC7A11、SIRT3蛋白表达升高（P<0.05）,LDH活性、TfR1蛋白表达及MDA、Fe²⁺、ROS含量降低（P<0.05）；与GE组比较，SIRT3抑制剂组细胞活力、GSH含量、SIRT3荧光强度及GPX4、SLC7A11、SIRT3蛋白表达降低（P<0.05）,LDH活性、TfR1蛋白表达及MDA、Fe²⁺、ROS含量升高（P<0.05）。结论 GE可改善LPS诱导的HCAEC炎症损伤，其机制可能与抑制细胞铁死亡及激活SIRT3信号通路有关。

关键词

栀子苷 / 沉默信息调节因子3 / 铁死亡 / 脂多糖 / 人冠状动脉内皮细胞