藤黄酸经MAPK途径对脂多糖诱导急性肺损伤的保护作用及机制研究

摘要

目的 探讨藤黄酸（gambogic acid, GA）对脂多糖（lipopolysaccharide, LPS）诱导急性肺损伤（acute lung injury, ALI）的保护作用及机制。方法 建立LPS诱导的ICR小鼠ALI模型及人支气管上皮细胞系BEAS-2B细胞模型，分为对照组、LPS组、GA（低、中、高）剂量组及地塞米松组。采用苏木精-伊红染色评估小鼠肺组织的病理损伤程度并进行评分，检测肺指数。采用MTS法检测GA与地塞米松对细胞活力的影响，苏木精-伊红染色观察BEAS-2B细胞的形态变化。采用联合转录组测序与分子对接技术预测GA的潜在作用靶点与通路。采用蛋白质印迹法检测细胞模型和动物模型中的肿瘤坏死因子-α、白细胞介素（interleukin, IL）-6、IL-1β、凋亡调节蛋白Bcl-2相关X蛋白、B细胞淋巴瘤-2的表达水平，以及MAPK途径关键蛋白p38、胞外信号调节激酶（extracellular signal-regulated kinase, ERK）、c-Jun氨基端激酶（c-Jun N-terminal kinase, JNK）的磷酸化程度。结果 与LPS组相比，GA中剂量组、GA高剂量组、地塞米松组小鼠肺损伤评分、肺指数降低（P<0.05）,BEAS-2B细胞结构损伤减轻。在细胞模型和小鼠模型中，与LPS组相比，GA中剂量组、GA高剂量组、地塞米松组肿瘤坏死因子-α、IL-6、IL-1β等促炎因子表达降低（P<0.05）。各组BEAS-2B细胞活力比较，差异无统计学意义（P>0.05）。转录组学结果提示，GA可能通过调节MAPK途径干预ALI。分子对接结果显示，GA可与p38、JNK及ERK蛋白稳定结合。细胞模型和小鼠模型实验均表明，GA中剂量组和GA高剂量组可抑制LPS诱导的p38、ERK及JNK磷酸化激活（P<0.05），并抑制LPS诱导的Bcl-2相关X蛋白/B细胞淋巴瘤-2比值增加（P<0.05）。结论 GA可减轻LPS诱导的ALI，其机制可能与抑制MAPK途径，发挥抗炎及抗凋亡效应有关。

关键词

急性肺损伤 / 藤黄酸 / MAPK途径 / 人支气管上皮细胞系BEAS-2B / 小鼠

基金资助

湖南省自然科学基金（2024JJ9604）; 邵阳市科学技术局科技计划项目（2025PT4063）; 邵阳学院横向科研项目（2024HX210）