青稞禾生指葡孢霉(Dactylobotrys gramincola)LAMP快速检测方法的建立及应用

摘要

青稞鞘腐病是由禾生指葡孢霉（Dactylobotrys gramincola）引起的穗部病害，严重影响青稞的产量和品质。本研究基于环介导等温扩增技术（loop-mediated isothermal amplification, LAMP）,以D.gramincola的ITS序列为基础，设计并筛选出1组特异性引物，通过优化反应温度，建立了灵敏度高且可快速检测青稞D.gramincola的LAMP检测方法。进一步对该方法的特异性和灵敏度进行评估，并对田间疑似发病植株的茎、旗叶、穗组织进行检测。结果表明，该LAMP检测体系在64℃下反应70 min即可从6种青稞病原菌中有效检测D.graminicola,检测灵敏度达13.07 fg·μL^-1,比常规PCR技术灵敏度高100倍。对田间疑似发病植株组织进行检测，穗部检出10份阳性样本，旗叶检出8份阳性样本，茎秆部位未检出，检出率为50%。该方法能够特异性检测青稞发病组织中的D.graminicola,为青稞鞘腐病的田间快速诊断及病原菌检测提供了新方法。

关键词

青稞 / 禾生指葡孢霉 / 环介导等温扩增 / 田间快速检测