小麦硫氧还蛋白TaTrxh10的特征及活性鉴定

摘要

硫氧还蛋白是一类在植物中普遍存在的氧化还原调控蛋白，在植物生长发育过程中发挥重要调控功能。为了探讨小麦硫氧还蛋白TaTrxh10的生物学功能，系统分析了该蛋白的序列特征、三维结构及其基因表达模式，并将该蛋白原核表达后进行了其对二硫键还原活性的体外鉴定。蛋白序列特征分析显示，小麦TaTrxh10包含3个成员，分别由3个同源基因TaTrxh10-A、TaTrxh10-B和TaTrxh10-D编码；3个成员均包含143个氨基酸，序列一致性为94.4%,且具有经典的硫氧还蛋白保守结构域和催化活性中心(WCGPC)。蛋白高级结构分析显示，TaTrxh10可形成由5个β-折叠和4个α-螺旋组成的三明治型特定空间结构。基因表达特性分析发现，TaTrxh10的3个同源基因在小麦根、茎和叶中的表达量极低，在子房和成熟种子中有较低水平的表达，而在成熟花粉中高表达。利用DTNB进行的硫氧还蛋白还原活性鉴定表明，TaTrxh10的3个成员均具有催化二硫键还原的功能，不过其还原活性在3个成员间存在一定差异；在较低浓度硫氧还蛋白的反应体系中，TaTrxh10-D的催化活性最高，TaTrxh10-B次之。以上结果表明，小麦TaTrxh10是一类在花粉中特异表达的有活性的氧化还原调控蛋白，这为进一步探讨小麦中依赖于氧化还原的发育调控机制提供了重要信息。

关键词

小麦 / 硫氧还蛋白 / 序列特征 / 原核表达 / 还原活性