小麦燕麦类似蛋白TaALP-7D自激活活性检测及其互作蛋白分析

摘要

为解析燕麦类似蛋白(avenin-like proteins, ALPs)在小麦品质中的调控机制，从小麦品种郑麦158中克隆了小麦燕麦类似蛋白基因TaALP-7D,并对其进行表达分析及其互作蛋白质筛选，确定与其互作的关键候选蛋白。结果表明，在小麦不同组织中，TaALP-7D基因在籽粒不同发育时期的相对表达量均最高，推测TaALP-7D基因可能参与小麦种子发育过程中面团强度相关基因的调控。利用酵母双杂交技术共筛选了6个可能与TaALP-7D互作的蛋白，分别是半胱氨酸水解酶1(XM＿044496235.1)、F-box蛋白SKP2A-like (XM＿044518121.1)、非特异性脂转移蛋白LTP1-like (XM＿044488525.1)和1,3-β-葡聚糖苷酶(XM＿044596055.1)以及与植物激素迫响应有关的乙烯响应转录因子TaERF1-like (XM＿044549609.1)和茉莉酸诱导的氧化酶JOX2-like (XM＿044519612.1)。经回转验证，5个代表性候选蛋白(半胱氨酸水解酶1、F-box蛋白SKP2A-like、非特异性脂转移蛋白LTP1-like、1,3-β-葡聚糖苷酶和乙烯响应转录因子TaERF1-like)与TaALP-7D均存在互作关系，推测TaALP-7D可能通过与这些蛋白互作，参与了小麦籽粒中贮藏蛋白(如醇溶蛋白)的降解、淀粉的合成以及其他与激素响应有关的过程。

关键词

小麦 / 燕麦类似蛋白 / TaALP-7D基因 / 表达分析 / 酵母双杂交 / 回转验证

基金资助

河南省重大科技专项(241100110300); 河南省中央引进地方科技发展资金项目(Z20241471126); 河南省农科院自主创新项目(2025ZC03)