大麦LRR型类受体蛋白激酶基因HvLRR-RLK510启动子的克隆与功能验证

董陈文华; 周洪斌; 郎雨萌; 罗亮扎; 李仕金; 姜瑞梅; 毛孝强; 赵海云; 唐进; 李勇; 王玫郦; 陈升位

麦类作物学报 ›› 2026, Vol. 46 ›› Issue (1) : 90 -100.

董陈文华, 周洪斌, 郎雨萌, 罗亮扎, 李仕金, 姜瑞梅, 毛孝强, 赵海云, 唐进, 李勇, 王玫郦, 陈升位

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摘要

为了解大麦LRR型类受体蛋白激酶基因HvLRR-RLK510启动子及其功能，以特异性PCR引物扩增大麦材料Morex和保大麦8号的HvLRR-RLK510基因启动子并构建pEASY^○R-510重组质粒，基于大肠杆菌Trans1-T₁菌株的阳性克隆测定获得2 368 bp的启动子序列。结果表明，通过在线软件Plant CARE预测，该启动子携带茉莉酸甲酯、脱落酸、低温等非生物因素的响应元件。经拟南芥转基因阳性植株和本氏烟草瞬时表达植株的根、茎、叶和花的GUS染色分析，所克隆启动子及其截短片段（-1 458、-868和-460 bp）可等效驱动GUS基因在花药中表达。qRT-PCR检测发现，茉莉酸甲酯（JAs）、脱落酸（ABA）、低温、聚乙二醇（PEG-2000）和光照能有效改变大麦叶片和根中HvLRR-RLK510基因的表达特性。HvLRR-RLK510基因启动子属诱导型启动子，携带茉莉酸、脱落酸、低温、干旱和光的响应元件，其-460 bp的截断片段可替代全长启动子；该启动子及其截断片段可用于HvLRR-RLK510基因转录调控机制解析。