三七总皂苷通过ADAM10/Notch3信号通路干预大鼠PASMCs增殖

摘要

目的：探讨在野百合碱（MCT）作用下三七总皂苷（PNS）对大鼠肺动脉平滑肌细胞（PASMCs）增殖的干预作用及其机制。方法：体外培养的PASMCs随机分为正常对照（Control）组、野百合碱（MCT）组、三七总皂苷（PNS）组、敲低（M+Si ADAM10）组、敲低后处理（M+P+Si ADAM10）组、过表达（M+OE ADAM10）组和过表达后处理（M+P+OE ADAM10）组。造模结束后，采用CCK-8法测各组细胞活力；蛋白质免疫印迹（Western blot）法分别检测细胞增殖细胞核抗原（PCNA）、解整合素金属蛋白酶10(ADAM10)、细胞神经源性基因座notch同源蛋白-3(Notch3)蛋白的表达情况。结果：在MCT作用下，PASMCs活力显著增强（P<0.05或P<0.01）;0～400 mg/L的PNS对正常细胞活力无毒性，100 mg/L的PNS可显著抑制MCT诱导的细胞活力（P<0.01）。在敲低ADAM10后PASMCs活力显著减弱（P<0.01）,PCNA蛋白表达明显下降（P<0.05），尤以M+P+Si ADAM10组为著；ADAM10、Notch3蛋白表达均显著下降（P<0.05或P<0.01），尤以M+P+Si ADAM10组为著。过表达ADAM10后PASMCs活力显著增强（P<0.01）,PCNA蛋白表达明显增高（P<0.01）,M+P+OE ADAM10组PCNA值稍偏高（P>0.05）,ADAM10、Notch3蛋白表达均显著升高（P<0.05）；而过表达ADAM10的同时使用PNS的PASMCs与敲低ADAM10的PASMCs相比，PCNA蛋白表达显著下降（P<0.01）,ADAM10、Notch3蛋白表达不同程度降低（P>0.05）。结论：PNS可能通过抑制ADAM10/Notch3信号通路，减弱大鼠MCT诱导的PASMCs增殖。

关键词

肺动脉平滑肌细胞 / 三七总皂苷 / 野百合碱 / ADAM10/Notch3通路 / 大鼠

基金资助

浙江省介入肺脏病重点实验室建设项目（2019E10014）; 温州市基础性科研项目（2024Y3124)