松脂醇二葡萄糖苷促骨质疏松性骨折愈合过程中血管生成的作用机制研究

摘要

目的：通过体内和体外实验探讨松脂醇二葡萄糖苷（PDG）促骨质疏松性骨折愈合过程中血管生成的调控机制。方法：将50只雌性C57BL/6J小鼠，随机分为5组：正常组、模型组、PDG 0.005、0.015 g/kg组、甲状旁腺激素1-34(PTH_1-34)4×10^-5g/kg组。建立去卵巢联合骨折的骨质疏松性骨折模型，PDG给药组隔天灌胃给药8周，PTH1-34组隔天给药皮下注射PTH_1-348周。Micro-CT扫描、免疫荧光和免疫组化染色检测相关参数及蛋白表达情况。培养人脐静脉血管内皮细胞（HUVECs），设置正常组、PDG 1、10、100μmol/L组、PTH_1-341 ng/mL组，CCK-8实验、划痕实验、管形成实验、免疫荧光染色以及Western blot实验检测相关参数及蛋白表达情况。结果：体内实验发现，与正常组比较，模型组小鼠骨折部位生成少量骨痂，股骨非骨痂部位骨密度（BMD）减少（P<0.01），骨体积分数（BV/TV）、骨小梁厚度（Tb. Th）、骨小梁数量（Tb. N）均降低（P<0.01），骨小梁分离度（Tb. Sp）升高（P<0.01），骨痂部位血管内皮标志分子（CD31）阳性表达减少（P<0.01）；与模型组小鼠比较，PDG 0.005 g/kg组小鼠骨折部位骨痂体积增大，BMD、BV/TV指数均升高（P<0.05）,PDG 0.015 g/kg组小鼠骨折部位骨痂体积进一步增大，BMD、BV/TV、Tb. Th、Tb. N指数均升高，Tb. Sp指数降低（P<0.01）,PDG给药组骨痂部位CD31阳性表达均增加（P<0.01）,PDG0.015 g/kg组血管内皮生长因子（VEGF-A）(P<0.01)、Yes关联蛋白1（YAP1）(P<0.01)、PDZ结合域的转录共刺激因子（TAZ）(P<0.05)和TEA转录因子2（TEAD2）(P<0.01)蛋白表达增加。细胞实验发现，与正常组相比，PDG给药组可不同程度促进HUVECs的增殖、迁移和管形成（P<0.05），降低E-钙黏附蛋白（E-cadherin）蛋白表达（P<0.01），增加VEGF-A、TEAD2、TAZ、YAP1蛋白表达（P<0.05）。结论：PDG可能通过调控Hippo信号通路促进骨血管生成，从而加速骨质疏松性骨折愈合。

关键词

松脂醇二葡萄糖苷 / 骨质疏松性骨折 / 骨生成 / 血管生成 / 血管内皮细胞

基金资助

国家自然科学基金项目（82074134）