基于NLRP3/Caspase-1/GSDMD通路对泼尼松联合淫羊藿苷提高激素抵抗型肾病综合征疗效的机制研究

摘要

目的：探讨泼尼松联合淫羊藿苷（icariin,ICA）对激素抵抗型肾病综合征（SRNS）的治疗作用及可能的分子机制。方法：体内实验用阿霉素建立大鼠模型，将大鼠分为空白组、模型组、泼尼松组(6.3 mg·kg^-1·d^-1)、联合组(泼尼松6.3 mg·kg^-1·d^-1+淫羊藿苷50 mg·kg^-1·d-1)，各给药组分别予相应药物灌胃，连续6周。CBB法检测大鼠24小时尿蛋白；全自动血液生化分析仪检测大鼠白蛋白、总胆固醇、甘油三酯、肌酐、尿素氮；HE、Masson染色检测大鼠肾组织形态学变化；免疫组化及Western blot检测GR-α、GR-β、NLRP3、caspase-1、GSDMD的表达。体外实验用阿霉素诱导HK-2细胞损伤模型，分为空白组、模型组、联合组和NLRP3沉默组，Rt-PCR检测GR-α、GR-β、caspase-1、GSDMD mRNA的表达，Western blot检测GR-α、GR-β、caspase-1、GSDMD蛋白的表达。结果：体内实验中，与空白组比较，模型组大鼠的体质量减轻，24小时尿蛋白增多，白蛋白减少，总胆固醇、甘油三酯、肌酐、尿素氮升高，肾小管萎缩，肾间质区水肿，其中炎症细胞浸润明显，有纤维组织增生，肾组织中GR-β、NLRP3、caspase-1、GSDMD的水平上升，GR-α的水平降低（P<0.01）；与模型组比较，联合组大鼠的体质量增加，24小时尿蛋白减少，白蛋白增多，总胆固醇、甘油三酯、肌酐、尿素氮降低，肾小管萎缩减轻，肾间质炎症细胞浸润减少，肾组织中GR-β、NLRP3、caspase-1、GSDMD的水平降低，GR-α的水平升高（P<0.01）。体外实验中，与空白组比较，模型组GR-β、caspase-1、GSDMD的mRNA及蛋白表达增加（P<0.01）,GR-α的m RNA及蛋白表达降低（P<0.01）；与模型组比较，联合组及NLRP3沉默组GR-β、caspase-1、GSDMD的mRNA及蛋白表达减少（P<0.01）,GR-α的m RNA及蛋白表达增加（P<0.01）。结论：泼尼松联合ICA对SRNS大鼠的肾脏具有保护作用，可以提高SRNS大鼠的疗效，其机制可能与NLRP3/caspase-1/GSDMD通路相关。

关键词

激素抵抗型肾病综合征 / 泼尼松 / 淫羊藿苷 / NLRP3/caspase-1/GSDMD通路