网络药理学-分子对接分析及实验验证蒙药高尤的肾功能保护作用机制

摘要

目的：通过网络药理学-分子对接及动物实验探讨蒙药高尤保护肾功能的作用机制。方法：运用中药相关数据库获取高尤作用于急性肾损伤（AKI）的有效活性成分和靶点、AKI疾病的相关靶点，把靶点和成分相互构建，作用于网络，富集分析药物及疾病的信号通路，并对网络中度值较高的药效成分与核心作用靶点进行分子对接验证研究。在此基础上通过建立急性肾损伤大鼠模型给予高尤干预后检测大鼠血清中肌酐（Cr）、尿素氮（BUN）、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、肾损伤分子-1(Kim-1)、胱抑素C(Cys-C)、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）含量并HE染色观察肾组织切片验证蒙药高尤对急性肾损伤大鼠肾功能保护作用。通过蛋白免疫印迹法（Western blot）验证预测信号通路。结果：网络药理学及分子对接分析得到关键靶点40个，并对关键靶点进行KEGG和GO富集分析，预测出ALB、AKT1、VEGFA、IL-6、CASP3等为关键靶点，癌症信号通路、TNF信号通路、PI3K/AKT信号通路等为关键通路。分子对接结果显示高尤主要的活性成分与相关作用靶点有较好的结合活性。动物实验结果表明高尤具有很好的肾功能保护作用，Cr、BUN明显低于模型组（P<0.05）;TNF-α含量明显降低（P<0.05）；急性肾损伤标志物Kim-1、Cys-C、NGAL均显著降低（P<0.05）。HE染色结果表明高尤能明显改善急性肾损伤的病理学状态。急性肾损伤模型大鼠肾组织中AKT1、p-AKT1、CASP3表达升高（P<0.05）；与模型组比较，高尤组大鼠肾组织中AKT1、p-AKT1、CASP3表达显著降低（P<0.05）。结论：高尤可通过多组分、多靶点的特点，从抗炎、抗氧化、抗血栓，抗凋亡等多通路途径发挥保护肾损伤大鼠肾功能作用，干预PKA3/AKT信号通路与细胞凋亡因子可能是其主要作用机制之一。

关键词

蒙药高尤 / 急性肾损伤 / 网络药理学 / 分子对接 / 作用机制

基金资助

国家药监局中药（蒙药）质量控制重点实验室开放基金项目（MDK2023032）; 内蒙古自治区直属高校基本科研业务费项目（GXKY22137）; 国家自然科学基金项目（81560702）; 蒙药研发国家地方联合工程研究中心开放基金项目（MDK2021034）; 内蒙古自治区研究生科研创新项目（B20210204Z）