依帕司他对放射性肺炎小鼠线粒体氧化应激损伤的保护作用

摘要

目的：探讨依帕司他（Epa）对放射性肺炎（RP）小鼠线粒体氧化应激损伤的影响及其机制。方法：C57BL/6小鼠随机对照（CON）组、放射（IR）组、IR联合10 mg/kg Epa处理组及IR联合20 mg/kg Epa处理组，每组各16只。采用6MV X线直线加速器全胸单次照射15 Gy建立放射性肺炎模型。照射后连续灌胃给药6～8周。HE染色观察肺组织病理变化。透射电镜观察肺组织线粒体结构。ELISA检测血浆白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及转化生长因子-β1(TGF-β1)的水平。免疫组化检测肺组织醛糖还原酶（AR）的表达。比色法检测肺组织丙二醛（MDA）及4-羟基壬烯醛（4-HNE）含量。制备肺组织单细胞悬液，使用DCFH-DA探针检测细胞内活性氧（ROS）水平。实时定量PCR检测AR、IL-6、TNF-α和TGF-β1 m RNA的表达。Western blot法检测AR、IL-6、TNF-α、TGF-β1、BAX、Bcl2、Cleaved Caspase-3、8-氧鸟嘌呤DNA糖基化酶1(OGG1)及沉默信号调节因子3(SIRT3)的蛋白水平。结果：与CON组相比，IR组肺泡水肿，肺泡间隔增厚并伴大量炎症细胞浸润；炎症因子IL-6、TNF-α和TGF-β1的水平明显升高（P<0.01）;Bcl2的表达明显下调而BAX、Cleaved Caspase-3的表达明显上调（P<0.05,P<0.01）。与IR组相比，Epa连续给药6～8周后，小鼠肺组织炎症损伤明显减轻，炎症因子IL-6、TNF-α和TGF-β1的水平明显降低（P<0.05,P<0.01），细胞凋亡程度明显减轻（Bcl2的表达上调而BAX、Cleaved Caspase-3的表达下调）。与CON组相比，IR组AR的表达明显升高，ROS、MDA及4-HNE的水平明显增加（P<0.01）,OGG1和SIRT3的表达明显降低（P<0.01），线粒体损伤明显加剧。而与IR组相比，Epa连续给药6～8周后，IR组AR的表达明显下调（P<0.05,P<0.01）,ROS、MDA及4-HNE的水平明显降低，OGG1和SIRT3的表达明显增加，线粒体损伤明显减轻（P<0.05,P<0.01）。结论：Epa对放射性肺炎具有保护作用，其作用可能与其抑制AR的表达，减轻线粒体氧化应激损伤，抑制炎症反应和细胞凋亡有关。

关键词

依帕司他 / 放射性肺炎 / 醛糖还原酶 / 线粒体 / 氧化应激 / 小鼠