金雀根通过阻断TRPM7抑制Erastin诱导的软骨细胞铁死亡

摘要

目的：探讨金雀根（Caragana sinica root,CSR）对Erastin诱导的软骨细胞铁死亡模型中铁死亡的影响及可能的机制。方法：培养C28/I2软骨细胞系，构建Erastin诱导铁死亡的细胞模型。采用MTT法检测细胞活力；Calcein/PI染色观察细胞活性；通过试剂盒检测细胞乳酸脱氢酶（LDH）及总谷胱甘肽（GSH）水平；荧光探针BODIPY 581/591C11标记检测活性氧（ROS）水平；Rh123和JC-1染色观察线粒体膜电位（ΔΨm）的变化；Western blot检测铁死亡相关蛋白（ACSL4、GPX4）和TRPM7蛋白的表达。结果：Erastin处理可降低软骨细胞活力，增加细胞毒性，诱发氧化应激，破坏ΔΨm，并上调ACSL4蛋白表达，同时下调GPX4蛋白表达，诱导软骨细胞铁死亡。相反，金雀根可以使细胞活力恢复，降低氧化应激反应，从而抑制软骨细胞铁死亡。此外，金雀根能降低Erastin引起的TRPM7蛋白表达水平的升高。结论：Erastin诱发了C28/I2软骨细胞脂质过氧化反应，引起线粒体损伤及铁死亡；金雀根可能通过阻断TRPM7抑制软骨细胞铁死亡，从而发挥保护软骨细胞的作用。

关键词

金雀根 / 软骨细胞 / Erastin / 铁死亡 / TRPM7