咪达唑仑通过调控JNK/STAT3通路对心肌梗死大鼠心脏功能及促血管生成作用的保护机制研究

摘要

目的：探讨咪达唑仑（MID）对心肌梗死（MI）大鼠心脏功能及促血管生成的保护作用和对c-Jun氨基末端激酶-信号转导及转录激活因子3(JNK/STAT3)通路的影响。方法：通过冠状动脉左前降支结扎法建立心肌梗死大鼠模型。对68只大鼠进行造模处理，排除死亡（n=3，死亡率≈4.4%）或造模失败（n=5）的大鼠，将纳入本次实验的60只MI大鼠随机分为模型组（Model组）、MID低、中、高剂量组（1 mg/kg MID-L组；3 mg/kg MIDM组；6 mg/kg MID-H组）、MID高剂量+JNK激活剂Anisomycin组（6 mg/kg MID-H+Anisomycin组），每组12只大鼠。另取12只假手术大鼠作为对照组（Control组）。对所有大鼠进行超声心动图检查并评估心脏功能。采用苏木精-伊红（HE）染色和Masson染色观察心肌组织病理形态及心肌纤维化程度；酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清心肌损伤标记物[肌酸激酶同工酶（CK-MB）和脑利钠肽（BNP）]及炎性因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)和C反应蛋白（CRP）]水平、心肌组织氧化应激指标[丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）和还原型谷胱甘肽（GSH）]水平；蛋白印迹法（Western blot）检测血管内皮生长因子（VEGF）、血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)、pJNK、JNK与p-STAT3、STAT3蛋白表达量。结果：与Control组比较，Model组大鼠心肌组织病损程度严重，心肌组织间质纤维化程度大大加深，胶原容积分数明显升高，心功能左室收缩末期内径（LVESD）、左室舒张末期内径（LVEDD）、CK-MB、BNP、CRP、TNF-α、IL-1β和MDA水平显著升高，左室射血分数（LVEF）、左室短轴缩短率（LVFS）、GSH和SOD水平显著降低，VEGF、VEGFR2蛋白表达水平显著降低，p-JNK/JNK与p-STAT3/STAT3显著升高（P<0.05）；与Model组比较，随着咪达唑仑剂量增加，MID-L、MID-M、MID-H组大鼠心肌组织病损程度明显减轻、心肌组织间质纤维化程度减轻，胶原容积分数降低，LVESD、LVEDD、CK-MB、BNP、CRP、TNF-α、IL-1β和MDA水平显著降低，LVEF、LVFS、GSH和SOD水平显著升高，VEGF、VEGF2R蛋白表达水平显著升高，p-JNK/JNK与p-STAT3/STAT3显著降低（P<0.05）；与MID-H组比较，MID-H+Anisomycin组大鼠心肌组织病损程度较重、心肌组织间质纤维化程度大大加深，胶原容积分数明显升高，心功能减弱，氧化应激反应和炎症加剧，LVESD、LVEDD、CK-MB、BNP、CRP、TNF-α、IL-1β和MDA水平升高，LVEF、LVFS、GSH、SOD、VEGF、VEGFR2蛋白表达水平显著降低，p-JNK/JNK与pSTAT3/STAT3显著升高（P<0.05）。结论：咪达唑仑可能通过调控JNK/STAT3通路改善心肌梗死大鼠心肌组织病损情况，减轻机体氧化应激和炎症反应，促进血管生成，从而发挥心脏保护作用。

关键词

咪达唑仑 / 心肌梗死 / 大鼠 / 心脏功能 / 血管生成 / c-Jun氨基末端激酶-信号转导及转录激活因子3通路