LOX-1促进低氧诱导的内皮细胞自噬与凋亡

摘要

目的：探讨低氧环境下植物凝集素样氧化性低密度脂蛋白受体-1(lectin-like oxidized lowdensity lipoprotein receptor-1,LOX-1)对内皮细胞自噬和凋亡的影响。方法：将人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells,HUVECs）分别给予低氧（1%O2）不同时间（0、6、12、24 h）处理后，观察细胞的自噬和凋亡水平。进一步通过干预LOX-1以探究其对自噬和凋亡的影响。采用荧光显微镜观察内皮细胞感染GFP-LC3B腺病毒后LC3B的表达；透射电镜检测自噬小体；Real-time PCR法检测LOX-1 mRNA水平；Western blot检测LOX-1、LC3II/I、Beclin-1、Atg 5、cleaved-caspase 3、Bax、Bcl-2蛋白表达；DCFH-DA荧光探针检测活性氧（reactive oxygen species,ROS）水平；Hoechst法、流式细胞术（Annexin V-PI双染）检测细胞凋亡。结果：低氧（1%O2）处理HUVECs 24 h，可明显增加荧光显微镜下LC3II斑点，上调LC3II/I蛋白表达，电镜下检测到自噬小体；低氧增加ROS生成，促进细胞凋亡；低氧上调HUVECs LOX-1 mRNA和蛋白的表达；LOX-1 siRNA可显著逆转低氧引起的细胞自噬，自噬相关蛋白（Beclin-1、Atg 5、LC3II/I）表达下调；LOX-1 siRNA能减少ROS生成，抑制细胞凋亡，促凋亡蛋白cleaved-caspase 3、Bax的表达下调，抑凋亡蛋白Bcl-2表达上调。结论：低氧诱导LOX-1表达上调，促进ROS生成，从而介导内皮细胞自噬与凋亡。

关键词

植物凝集素样氧化性低密度脂蛋白受体-1 / 低氧 / 自噬 / 凋亡 / 内皮细胞