基于调节肠道菌群的疏风解毒胶囊改善甲型流感病毒肺炎小鼠肺损伤的机制研究

摘要

目的：研究疏风解毒胶囊（SFJDC）对病毒性肺炎小鼠肺损伤的改善作用及可能机制。方法：48只BALB/c小鼠采用甲型流感病毒H1N1滴鼻建立病毒性肺炎模型后，随机分为4组，每组12只，除模型组外，给药组分别给予奥司他韦（OSTW）、疏风解毒胶囊低、高剂量（SFJDC-L、SFJDC-H）灌胃，另取12只小鼠做为正常组。连续给药7 d，给药过程中计算体质量变化率及肺指数、疾病活动指数；给药结束后取肺、肠组织及肠道内容物，苏木素-伊红（HE）染色法检测小鼠肺组织的病理改变；RT-qPCR法检测小鼠肺组织甲型流感病毒（influenza A,infA）载量、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)m RNA的表达；16S rRNA高通量测序法检测小鼠肠道菌群；ELISA法检测小鼠血清中脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）水平；Western Blotting法检测小鼠肺组织环鸟嘌呤-腺嘌呤核苷酸合成酶（cyclic GMP-AMP synthase,cGAS）、干扰素基因刺激蛋白（stimulator of interferon genes,STING）、磷酸化干扰素基因刺激蛋白（phospho-STING,p-STING）、核因子-κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)、磷酸化核因子-κB(phospho-NF-κB,p-NF-κB)、紧密连接蛋白（zonula oc-cludens 1,ZO-1;Occludin）。结果：与模型组比较，疏风解毒组小鼠肺指数、病毒载量显著降低（P<0.01）DAI评分显著降低；肺组织炎症明显减轻，伴肺组织TNF-α和IL-6 m RNA表达水平降低（P<0.01）；肠道厚壁菌门、毛螺菌科丰度显著升高（P<0.01)，拟杆菌门、拟杆菌科丰度显著降低（P<0.05、P<0.01）；肠组织ZO-1、Occludin蛋白表达量显著增加（P<0.05），血清LPS水平显著减少（P<0.01）；肺组织c GAS、p-STING、p-NF-κB蛋白表达量显著下降（P<0.05、P<0.01）。结论：疏风解毒胶囊减轻小鼠肺组织的炎症反应，其机制可能与其调节肠道菌群、保护肠黏膜屏障，从而减少肠道漏出的LPS对肺组织c GAS/STING/NF-κB信号通路活化有关。

关键词

疏风解毒胶囊 / 甲型流感病毒 / 肠道菌群 / 环鸟嘌呤-腺嘌呤核苷酸合成酶/干扰素基因刺激蛋白/核因子-κB信号通路