ELISA法对大鼠血清中HLX43药代动力学的探索性研究

摘要

目的：以酶联免疫吸附试验（ELISA）为基础建立可快速检测大鼠血清中的抗体偶联药物HLX43结合抗体以及总抗体的分析方法，并用来探索大鼠单次静脉注射给药的药代动力学特征。方法：以ELISA的检测原理为基础，在96孔板上包被Goat anti-Human IgG（检测总抗体）或Anti-payload antibody（检测结合抗体），加入待测样品，用Goat anti-human IgG Monkey ads-HRP作为检测抗体进行检测，加入TMB底物显色一段时间后，加入终止液中止反应，使用酶标仪SoftMax软件在双波长450 nm/630 nm下读取吸收度，采用A_{450 nm}-A_{630 nm}读值进行数值拟合，参考相关法规要求进行初步验证后，SD大鼠静脉注射15 mg/kg HLX43取血检测血药浓度，并计算药代动力学参数。结果：确定分析方法的线性范围为200～6 000 ng/mL，对分析方法的标准曲线、精密度、准确度、钩状效应、稀释线性以及选择性（基质效应）的考察结果均可接受。对SD大鼠血清样品进行定量分析，得到HLX43的药代动力学参数，检测结合抗体和检测总抗体的方法所得出的t_1/2分别为110.9 h和110.6 h,C_max分别为343.3μg/mL和386.3μg/mL,AUC_0-inf分别为13 977.511 h·μg·mL^-1和16 916.523 h·μg·mL^-1。结论：本研究建立了两种快速灵敏的方法用于HLX43的药动学研究，为抗体偶联药物的临床研究奠定了基础。

关键词

酶联免疫吸附试验(ELISA) / 定量测定 / 抗体偶联药物 / 药代动力学