铁皮石斛多糖通过上皮间质转化和Notch信号通路体外抗肝纤维化作用机制

摘要

目的：探讨铁皮石斛多糖（DOP）通过上皮间质转化（EMT）和Notch信号通路对TGF-β1诱导肝星状细胞（HSC）系HSC-T6细胞活化的影响及其抗肝纤维化（HF）机制。方法：采用CCK-8法检测DOP对HSC-T6细胞的给药浓度，并计算24 h半数抑制浓度(IC₅₀)，确定安全给药剂量。将HSC-T6细胞随机分为正常对照组，TGF-β1活化组（10 ng/mL）以及低、中、高剂量DOP组（1.6、3.2、6.4 mg/mL）。TGF-β1活化组及各药物组均加入10 ng/mL的TGF-β1，各药物组同时给予相应浓度药物，共处理24 h。采用CCK-8法检测DOP干预后各组HSC-T6细胞的活性，采用RT-qPCR和Western blot法检测各组纤维化相关指标（α-SMA、COL-I）、EMT相关指标（E-cadherin、Vimentin、ZEB1）以及Notch信号通路相关指标（Notch1、Jagged1、Hes1）的m RNA及蛋白表达水平。结果：DOP干预24 h后，与TGF-β1活化组相比，中、高剂量DOP组的HSC-T6细胞活性受到显著抑制（P<0.01），且细胞中α-SMA、COLI、 Vimentin、 ZEB1以及Notch1、 Jagged1、 Hes1的mRNA及蛋白表达水平均显著降低，E-cadherin表达显著升高（P<0.05或0.01），而低剂量组对HSC-T6细胞的影响较小。结论：DOP可通过直接抑制HSC的活化以及TGF-β1活化HSC中的EMT、Notch信号通路，或间接通过抑制Notch信号抑制EMT，发挥抗HF作用。

关键词

铁皮石斛多糖 / 肝纤维化 / 肝星状细胞 / 上皮-间质转化 / Notch信号通路