NF-κB在脂多糖诱导小鼠脓毒症急性肺损伤中对ANXA2表达的影响

摘要

目的 观察脂多糖(LPS)诱导脓毒症急性肺损伤(ALI)小鼠肺组织中膜联蛋白A2(ANXA2)的表达水平，探讨ANXA2的表达与核转录因子-κB(NF-κB)信号通路的关系。方法 健康雄性C57BL/6小鼠18只，随机分为空白对照组、脂多糖组(LPS组)及LPS+NF-κB抑制剂组(以下为抑制剂组),每组6只。抑制剂组腹腔注射NF-κB信号通路抑制剂吡咯烷二硫代甲酸铵(PDTC) 50 mg/kg, 1 h后LPS组及抑制剂组腹腔注射LPS 7.5 mg/kg,观察12 h,全身麻醉后采血并处死小鼠。HE染色观察肺组织病理学特征，测右肺中叶湿干重、计算湿/干重比值，ELISA法检测血清ANXA2及左肺肺泡灌洗液中ANXA2、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平，免疫组化法检测肺组织ANXA2、NF-κBp65、p-NF-κBp65蛋白平均光密度(MOD)值，RT-qPCR检测肺组织中NF-κBp65、TNF-α及IL-6 mRNA相对表达量，WB检测肺组织ANXA2、NF-κBp65、p-NF-κBp65、Claudin1蛋白表达量。结果 与空白对照组比较，LPS组肺组织病理损伤严重，可见细支气管上皮细胞坏死脱落、肺泡间隔增厚、肺泡腔内巨噬细胞和淋巴细胞渗出、少许出血。与空白对照组比较，LPS组右肺中叶湿/干重比值，血清ANXA2及肺泡灌洗液ANXA2、TNF-α水平，肺组织NF-κBp65、TNF-α及IL-6 mRNA相对表达量，肺组织ANXA2、NF-κBp65、p-NF-κBp65蛋白MOD值以及蛋白表达均显著升高(P<0.05),而Claudin1蛋白表达显著下降(P<0.05);与LPS组比较，抑制剂组以上各项观察指标均明显改善(P<0.05)。结论 NF-κB信号通路在LPS诱导小鼠脓毒症相关ALI肺组织中可调控ANXA2的表达。

关键词

脓毒症 / 急性肺损伤 / ANXA2 / NF-κB信号通路 / TNF-α

基金资助

新疆维吾尔自治区自然科学基金项目(2022D01C224)