NEFL、NRN1在二乙酰吗啡致神经元凋亡中的作用

摘要

目的 探究神经丝轻链蛋白(Neurofilament light chain, NEFL)、神经突起素(Neuritin, NRN1)在二乙酰吗啡致神经元凋亡中的作用。方法 建立二乙酰吗啡成瘾SD大鼠模型，分为Control组、Model组，观察各组大鼠脑组织病理形态学改变、凋亡细胞数及凋亡相关因子蛋白质表达变化；Western blot检测各组大鼠脑组织中NEFL、NRN1、Bax和Bcl-2的蛋白表达；采用NEFL慢病毒转染大鼠原代小脑颗粒细胞，使用Western blot技术检测转染效率，分为NC组、Model组和sh-NEFL+M组，使用二乙酰吗啡干预Model组和sh-NEFL+M组。采用CCK-8法检测细胞活力；流式细胞术检测细胞凋亡率；Western blot检测细胞NEFL、NRN1、Bax和Bcl-2的蛋白表达。结果 成瘾SD大鼠脑组织HE染色和Hoechst33342荧光染色显示，与Control组相比，Model组大鼠脑组织出现明显筛网状改变，凋亡细胞数目明显增加；Western blot结果显示，Model组中NEFL、Bax蛋白表达升高，NRN1、Bcl-2蛋白表达降低，差异具有统计学意义(P<0.05);在二乙酰吗啡干预原代小脑颗粒细胞后，与Control组相比，Model组的细胞活力明显降低，凋亡率明显升高，NEFL和Bax蛋白表达显著升高，NRN1和Bcl-2蛋白表达显著降低，差异具有统计学意义(P<0.05);与Model组相比，sh-NEFL+M组细胞活力显著升高，凋亡率显著降低，NEFL、Bax蛋白表达降低，NRN1、Bcl-2蛋白表达升高，差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 NEFL、NRN1在二乙酰吗啡致小脑颗粒细胞凋亡中发挥重要作用，降低NEFL表达可减少二乙酰吗啡致小脑颗粒细胞凋亡。

关键词

神经元 / 凋亡 / 二乙酰吗啡 / NEFL / NRN1