基于Klarite^TM芯片表面增强拉曼光谱法快速检测血清中他克莫司的药物浓度

摘要

目的 采用Klarite^TM芯片表面增强拉曼光谱技术建立一种快速测定血清中他克莫司浓度的方法。方法 采用Klarite^TM芯片表面增强拉曼光谱技测定他克莫司胶囊粉末的拉曼光谱和特征峰，并对各峰进行振动模式归属分析。通过滴涂沉积拉曼光谱（Drop coating deposition Raman, DCDR）技术测定芯片表面他克莫司水溶液及PBS缓冲液溶液中他克莫司的检出限，明确第五代Klarite^TM芯片对测定他克莫司浓度的效能。结果 拉曼光谱显示他克莫司在354～396、474、851～917和1 088 cm^-1处产生尖峰，在1 265～1 475 cm^-1处出现明显的宽峰。他克莫司在蒸馏水和PBS溶液中的检测限分别为0.14μg/mL和2.5μg/mL,定量限分别为0.47μg/mL和8.3μg/mL。他克莫司在蒸馏水中定量检测的回归方程为：Y=52.86X+596.5,他克莫司的浓度在0.1～50.0μg/mL范围内线性关系良好，相关系数为0.890 5;他克莫司在PBS溶液定量检测的回归方程为Y=19.54X+537.8,他克莫司的浓度在5.0～50.0μg/mL范围内线性关系良好，相关系数为0.217 6。在按比例稀释（1∶4, v/v）的人血清溶液中，可检测到他克莫司的拉曼光谱特征峰主要分布在352、488、855、1 135、1 213和1 456 cm^-1处，峰值强度均明显减弱，且发生不同程度的频率偏移。结论 本检测方法灵敏度高，操作简单、快速便捷，适用于他克莫司血药浓度的临床监测。

关键词

表面增强拉曼光谱 / Klarite^TM芯片 / 他克莫司 / 快速检测